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創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 11:04:43瀏覽次數(shù):203

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013439 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供科研    
創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產品:益母草堿CAS:24697-74-3腫瘤干細胞熒光定性檢測試劑盒
485-47-2茚三酮動物肝星狀細胞分離培養(yǎng)試劑盒
海神弧菌動物肝細胞分離培養(yǎng)試劑盒
人肝癌細胞;HepG2品牌動物新生心肌細胞分離培養(yǎng)試劑盒

詳細介紹

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產品名稱

規(guī)格

貨號

創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013439

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑Multi-class antibodies: 48T

 STAT6 信號轉導和轉錄激活因子6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgG  0.1ml

AMA(Mouse  myocardial antibody) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體 96T

NUP54 NUP54抗體 0.2ml

Phospho-BRCA1 (Ser1189) 磷化癌易感基因1抗體 0.1ml

 STAT6 信號轉導和轉錄激活因子6抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgAMulti-class antibodies: 48T

 Klf4 腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LASS4 長壽相關基因lASS4抗體  0.2ml

AChRab(Human acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 人乙酰膽受體抗體 96T

PTPIP51 蛋白酪磷相互作用蛋白51抗體 0.2ml

CCDCNL 卷曲螺旋結構域蛋白NL抗體 0.2ml

 Klf4 腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml

GSTCD 硫轉移C段結構域抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh APH1a 早老γ分泌抗體  0.2ml

 IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光標記抗白介14抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/APC APC標記的兔抗人分泌型IgA  0.1ml

 PTN/FITC 熒光標記多效生長因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
創(chuàng)傷弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒爪哇根霉種屬: RhizopusjavanicusTakada安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 糖化菌培養(yǎng)基: 17,50生長條件: 28-30℃

紫色鏈霉菌種屬: Streptomyces│violaceus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

解淀粉類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│amylolyticus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

季也蒙畢赤酵母種屬: Pichia│guilliermondii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

(ALD)ELISA試劑盒辛乙酯 natural, ≥98%, FCC甲基柏木酮 鹽

固酮(ALD)ELISA試劑盒戊乙酯 分析標準品,≥99.7% (GC)5-甲基-2-己酮 99%鹽(標準品)

全段甲狀旁腺(i-PTH)ELISA試劑盒戊乙酯 ≥98%, FG4-甲 99%馬來氟伏沙明

去乙?;?/span>Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA試劑盒香葉  97%4-甲 ≥99%, FCC, Kosher馬來氟伏沙明(標準品)

去乙酰化Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA試劑盒乙香葉酯 96%麥芽酚 99%福美斯坦

去乙?;?/span>Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA試劑盒乙葉酯 98%麥芽酚 99%,FCC,FG福美斯坦(標準品)

去乙?;?/span>Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA試劑盒正己 Standard for GC,>99.5%(GC)二氫酮甲酯 96%福辛普利鈉

去乙?;?/span>Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA試劑盒正己 98%對甲氧基甲 98%呋塞米(速尿)

去乙?;?/span>Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA試劑盒正己 分析標準品,>99.8%(GC)庚炔羧甲酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG呋塞米(標準品)

去乙酰化饑餓(dGHRL)ELISA試劑盒正己 99%庚炔羧甲酯 98%氫加蘭他敏

去唾液糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒正庚 Standard for GC甲酯 99%吉非羅齊

去唾液糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒正庚 AR,98.0%甲酯 ≥98%, FCC,FG吉非羅齊(標準品)

去甲腎上腺(NE)ELISA試劑盒正庚 分析標準品2-甲基丁基乙酯 99齊特

去甲腎上腺(NA)ELISA試劑盒正己 Standard for GC, ≥99.5% (GC)2-甲基-1-基-2- 99%特(標準品)

去氨加壓/1-去氨基-8-右旋-精氨加壓(dDAVP)ELISA試劑盒正己 CP,98.0%        2-壬炔甲酯 98%格列本脲

趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒正己 分析標準品2-壬炔甲酯 Kosher, ≥99%格列本脲(標準品)
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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