參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):副豬嗜血桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013425
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
LIR-6/CD85i/LILRA1/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞球蛋白樣受體6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SUMO/FITC 熒光標(biāo)記類(lèi)泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRB1 腎上腺能受體β1抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
GRIK5 谷受體紅藻離子5抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
SUMO/FITC 熒光標(biāo)記類(lèi)泛蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AD(Human amiodarone) ELISA Kit 人乙胺碘呋酮Multi-class antibodies: 48T
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
BMP-7 ELISA Kit (Rabbit) 兔骨成型蛋白7 96T
Pumilio 2 PUM2蛋白抗體 0.2ml
CNOT6 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
PEG3 PEG3蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP4 GTPIMAP家族成員4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC5 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 0.2ml
IL-17RB/FITC 熒光標(biāo)記白介-17B受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgM 0.5ml
RAD51C/FITC 熒光標(biāo)記癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
副豬嗜血桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
赭褐鏈霉菌種屬: Streptomyces│umbrinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
普通鏈霉菌種屬: Streptomyces│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
紅曲霉種屬: Monascus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 法葡萄糖。培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒三乙酰 98%氨茶 98%度他雄(標(biāo)準(zhǔn)品)
性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF)ELISA試劑盒特戊酰 98%氨茶 藥用級(jí)依達(dá)拉奉
松弛肽/松弛(RLN)ELISA試劑盒正戊酰 98%茶 藥典BP級(jí)依達(dá)拉奉(標(biāo)準(zhǔn)品)
松弛(RLN)ELISA試劑盒 AR,98%茶 無(wú), ≥99%, 粉末氫化奎寧定;雙氫奎尼丁
四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 GCS, ≥99.5% (GC) 1-乙酰咪唑 99%鹽依匹斯汀
四連接(CLEC3B)ELISA試劑盒 GR,99%1,2-二甲基咪唑 99%鹽依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)ELISA試劑盒 分析標(biāo)準(zhǔn)品癸二二辛酯 AR,97.0%依普利酮
絲狀血球凝集(FHA)ELISA試劑盒碳化 1-200目,98%馬來(lái)二丁酯 97%依普利酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲裂原激活的蛋白激/MAP激(MAPK)ELISA試劑盒碳化 1-10 μm,98%癸二二丁酯 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)ELISA試劑盒碳化 99%,50nm2-辛酮 98%戊雌二
絲裂原活化蛋白激(MAPK)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 98.5%,用于紙層析仲辛 AR,98%依替膦鈉
絲氨肽2甘露聚糖結(jié)合凝集(MASP2)ELISA試劑盒1,3,3-基-2-亞甲基吲哚啉 97%仲辛 CP,97%*度
絲氨蛋白抑制因子肽抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒氮化 1 μm, 98.5%仲辛 Standard for GC,≥99.5% (GC)*度(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲氨蛋白HTRA1(HTRA1)ELISA試劑盒碳化硅 99%,0.5~0.7um仲辛 ≥99% (GC)*孕烯
絲氨蛋白(PRSS)ELISA試劑盒化鈦 98%,4 ~ 8μm仲辛 ≥98%,FG依維莫司
絲氨/蘇氨激24(STK24)ELISA試劑盒碳化鈦 99%,2-4μm硫鉍 CP,98.0%醋氟輕松;醋膚輕松
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。