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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：地衣形芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013506
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit 人核基質(zhì)蛋白22Multi-class antibodies： 48T
SPHK1 鞘氨醇激1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白18 96T
Notch1 跨膜受體蛋白Notch-1抗體 0.1ml
C7orf27 7號(hào)染色體開放閱讀框27抗體 0.2ml
SPHK1 鞘氨醇激1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒細(xì)胞膠原Multi-class antibodies： 48T
OPCML 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ID1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體 0.1ml
FDP ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物 96T
PRRSV 豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病毒抗體 0.2ml
C17orf78 17號(hào)染色體開放閱讀框78抗體 0.2ml
OPCML 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Mink IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GABPB2 GA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARH/LDL receptor adaptor protein 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 0.2ml
phospho-IkB beta (Ser23)/FITC 熒光標(biāo)記磷化KB抑制蛋白β抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
Pokemon/FITC 熒光標(biāo)記兔抗蒙抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
地衣形芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒羅伊氏乳桿菌種屬: Lactobacillus│reuteri分離基物: 人的腸內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)研究。用于益生菌類保健食品。培養(yǎng)基: CM0789生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│sp.分離基物: 鹽湖土壤樣品提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及嗜鹽微生物其它方面的研究培養(yǎng)基: 38生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法
鼠李糖乳桿菌種屬: Lactobacillus│rhamnosus分離基物: 臨床樣品提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)FI血清標(biāo)準(zhǔn)菌株。培養(yǎng)基: CM0789生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
啤酒神金黃桿菌種屬: Chryseobacterium│gambrini分離基物: steel surface of a beer-bottling plant提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 451生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
谷氨脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒焦性沒食子 AR,98%氧化銠，合 銠 55%丁二酮肟(鎳試劑)
谷氨脫羧自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒焦性沒食子 >99.0%(GC)四鈀鈉 98%黃酮
谷氨脫羧65(GAD65)ELISA試劑盒沒食子酯 98%碳銀 CP,98.0%放線菌D(進(jìn)分)
谷氨脫羧(GAD)ELISA試劑盒3,4,5-氧基甲 99%金鈉 金含量,48% 放線菌D
谷氨脫氫(GDH/GLDH)ELISA試劑盒2，3，4-三羥基甲 98%銀 銀含量, 77.0 % 依維菌
谷氨受體(NMDAR)ELISA試劑盒2,3,4-氧基甲 98%四（三基膦）鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)
谷氨-半胱氨連接調(diào)節(jié)亞基(GCLM)ELISA試劑盒1,2,3-氧基 98%間 CP,98%CAPE (咖啡乙酯)
谷氨[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)ELISA試劑盒2,3,4-氧基甲 97%間 GCS,>99.5%(GC)磺-5-甲氧嘧啶(98%)
孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒2，3，4-三羥基甲 97%間 GR，99%雙甲脒（標(biāo)準(zhǔn)品）
鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒吖啶橙 電泳級(jí)間 分析標(biāo)準(zhǔn)品，用于環(huán)境分析，>99.6%(GC)雙甲脒
鉤端螺旋體IgG(Leptospira)ELISA試劑盒4-(2-氨乙基)磺酰氟鹽鹽 98%2,3-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品檸檬一
鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒放線菌D 98%（劇品）2,3-二酚 98%Salubrinal
睪酮受體(TR)ELISA試劑盒四氮唑藍(lán) 98%1,2,4-三 GR，99%伯安喹；伯氨喹
睪酮(Testoterone)ELISA試劑盒赫斯特?zé)晒馊剂希?3258 98%1,2,4-三 Standard for GC, ≥99.5% (GC)D-熒光,蟲熒光
睪酮(T)ELISA試劑盒赫斯特?zé)晒馊剂希?3342 98%甲中1,2,4-三標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品麻保沙星;馬波沙星
高香草(HVA)ELISA試劑盒貝他定鹽 98%1,2,4-三 CP，96%MK0677，伊布莫侖甲磺鹽
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