詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013507 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照), 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit 人巨噬細胞刺激蛋白Multi-class antibodies: 48T
Spectrin-Alpha 血影蛋白/收縮蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
LTC4 ELISA Kit 大鼠白三烯C4 96T
Newcastle disease virus 雞新城疫病毒抗體 1ml
BRLF1 立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因) 0.1ml
Spectrin-Alpha 血影蛋白/收縮蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊蟲病抗體Multi-class antibodies: 48T
Ki-67 (Proliferation Marker) Ki-67單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LATS1 抑制基因LATS1抗體 0.2ml
DHEA-S7(Human Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit 人脫氫表雄酮S7 96T
PRRSV M protein 豬藍耳病病毒M蛋白抗體 1ml
CCDC158 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體 0.2ml
Ki-67 (Proliferation Marker) Ki-67單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Mink IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗貂IgG 0.1ml
GAD65 + GAD67 谷脫羧65+谷脫羧67抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ARHG7 p21活化蛋白激ARHG7抗體 0.2ml
IKB Beta/FITC 熒光標記KB抑制蛋白β抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗貂IgG 0.1ml
Podoplanin Protein/FITC 熒光標記平足蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
小孢子酒曲菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次發(fā)酵乳桿菌種屬: Lactobacillus│fermentum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0033生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
米曲霉種屬: Aspergillus│oryzae分離基物: 原醬油提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 醬油糖化菌。培養(yǎng)基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
坎德拉沙門氏菌種屬: Salmonella│kandla提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 17 z29 -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
運動發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 519生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒刀豆凝集A 2 μg/ml1,2,4-三 光譜純瓊脂粉
高糖基化絨毛膜促性腺(hCG)ELISA試劑盒 USP級氫氧化鈉 GR,97%,片狀三氟胸苷;三氟尿苷(TFT)
高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-2-羥基-1-磺 99%6-氨基熒光 >97%(HPLC)四合輔羧;四合硫焦酯
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒橘霉 98%5(6)-氨基熒光 熒光級,>94%(HPLC)甲磺加替沙星
高遷移率族蛋白1(HMGB1)ELISA試劑盒硫葡聚糖 M.W 5000005-氨基熒光 96%鹽哌羅匹隆
高敏狀腺原氨(u-T3)ELISA試劑盒葡聚糖10 分子量100006-羧基熒光 95%替拉扎明
高敏甲狀腺(u-T4)ELISA試劑盒毛地黃皂苷 50%5-羧基熒光 95%糊精;白糊精
高密度脂蛋白膽固(HDL-C)ELISA試劑盒4,’6-二脒基-2-基吲哚 98%5-羧基四甲基羅丹明 95%鹽芐達明
高密度脂蛋白3(HDL3)ELISA試劑盒十二基吡喃葡萄糖苷 99%5(6)-羧基熒光二乙酯 for fluorescence, ≥90.0% (HPLC)葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)
高密度脂蛋白2(HDL2)ELISA試劑盒硫葡聚糖鈉鹽 分子量500000,無DNA/RND/蛋白6-羧基熒光二乙酯 95%葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)
高密度脂蛋白1(HDL1)ELISA試劑盒三脫氧鳥苷鈉鹽 98%5-羧基熒光琥珀酰亞酯 90%L-(+)-扁桃;S-扁桃
高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒三脫氧鳥苷溶液 dGTP,100 mM 溶液, pH 7.05(6)-羧基熒光 95%D-(-)-扁桃;R-扁桃
高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)ELISA試劑盒N-癸?;?N-甲基葡糖 生化試劑級,BC5(6)-羧基熒光琥珀酰亞酯 96%1-氨基海因鹽鹽;AHD,1-氨基乙內(nèi)酰脲鹽鹽
高分子量脂聯(lián)(HMW Adiponectin)ELISA試劑盒N-癸?;?N-甲基葡糖 高純級6-羧基熒光琥珀酰亞酯 90%1-氨基海因鹽鹽(標準品)
高分子量角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒糖原 ≥90% 5- 羧基熒光二乙酯 95%人促腎上腺皮質(zhì)(1-24),替可克肽
高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒乙酰 98%異硫熒光(異構(gòu)體I) 90%緩激肽