詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013426 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
(EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生長因子受體Multi-class antibodies: 48T
SUMO 1 類泛蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人癌易感蛋白2 96T
NDUFS7 線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體 0.2ml
BDH1 3-羥丁脫氫抗體 0.2ml
SUMO 1 類泛蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人丙型肝炎IgMMulti-class antibodies: 48T
Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh laminin 層粘連蛋白抗體 0.1ml
BMPR-1A ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受體1A 96T
Pumilio 1 PUM1蛋白抗體 0.2ml
CCDCA 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白A抗體 0.2ml
Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP5 GTPIMAP家族成員5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC6/CDC16 細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體 0.2ml
IL-17RD/FITC 熒光標(biāo)記白介17受體D抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Rad52/FITC 熒光標(biāo)記Rad52抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
牛附紅細(xì)胞體(牛嗜血支原體)PCR試劑盒蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
北極嗜冷居菌種屬: Glaciecola│arctica分離基物: 沉積物/深層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
停乳鏈球菌種屬: Streptococcus│dysgalactiae提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
絲氨/蘇氨蛋白(STK)ELISA試劑盒碳化鈦 99%,40nm硫鉍 AR,99%醋氟輕松;醋膚輕松(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲氨/蘇氨蛋白激PAK4(PAK4)ELISA試劑盒碳化鈦 99.99% metals basis氫氧化鉍 AR,90%馬來氟吡汀
絲氨/蘇氨蛋白激B-raf(BRAF)ELISA試劑盒無三化鐵 ≥99.9% metals basis次碳鉍 AR,90.0%馬來氟吡汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
蛭(HRD)ELISA試劑盒無三化鐵 AR,98%次碳鉍 CP氟維司群
閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒1,2,4,5-四 95%α,α'-二溴對二甲 97%孕二烯酮
通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒乙酯 AR,99% 重氮乙乙酯 91%,≤10% dichloromethane孕二烯酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
通道蛋白4抗體(AQP-4 Ab)ELISA試劑盒乙酯 CP,98% 甲 95%海沙瑞林
通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒乙肟 99%0.99艾地醌
通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒酮肟 98%標(biāo)準(zhǔn)溶液1.35-4.29mg/L,質(zhì)分析用艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)
通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒丁酮肟 99%叔丁 98%伊潘立酮
通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒環(huán)己酮肟 97%叔丁 95%伊潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
通道蛋白2(AQP2)ELISA試劑盒羥基乙酰 98%叔丁鈉 98%亞培南
通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒羥-O-磺 97%N,N-二甲酰 農(nóng)殘級, ≥99.9%亞培南(標(biāo)準(zhǔn)品)
通道蛋白1(AQP1)ELISA試劑盒肟 98%2-甲 98%吲達(dá)帕
通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒硝釓,六 AR,99% 97%吲達(dá)帕(標(biāo)準(zhǔn)品)
雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒硝釓,六 99.99% metals basis鈉 97%帕(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。