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基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 11:04:33瀏覽次數(shù):197

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013440 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:9002-07-7胰蛋白酶(豬胰) 100克動(dòng)物脂肪組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
蛇形毛圓線(xiàn)蟲(chóng)PCR試劑盒國(guó)產(chǎn)動(dòng)物腎上腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
54957-90-3喹啉硫酸鹽動(dòng)物骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
6138-23-4D-海藻糖動(dòng)物腦組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013440

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

L-HDC /FITC 熒光標(biāo)記L-組脫羧抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 STAT6 /FITC 熒光標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AEV polyprotein 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體  0.1ml

Rabbit  Goat IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

GLTPD2 糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG  0.5ml

 STAT6 /FITC 熒光標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性瘤激Multi-class antibodies: 48T

 Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷化谷受體1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGFR3/CD16 FC段γ受體3/球蛋白G Fc段受體III抗體  0.1ml

RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受體活化因子配基 96T

PTPH1 蛋白酪磷H1抗體 0.2ml

ChAT ChAT膽乙酰轉(zhuǎn)移抗體 0.1ml

 Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷化谷受體1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml

GTDC1 糖基轉(zhuǎn)移樣1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh API2 凋亡抑制因子2抗體  0.2ml

 IL-13Ra2/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-13受體a2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/Bio 生物標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA  0.1ml

 Survivin/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記 Survivin 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)Multi-class antibodies: 0.2ml
基孔肯尼雅病毒RT-PCR試劑盒谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-色氨。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

意大利游動(dòng)放線(xiàn)菌種屬: Actinoplanes│italicus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain;培養(yǎng)基: 0011生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

傷寒沙門(mén)氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

黃曲霉種屬: Aspergillus│flavus分離基物: 曲藥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀酒,產(chǎn)蛋白培養(yǎng)基: 0416生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

趨化因子配體17(CXCL17)ELISA試劑盒正己 AR,99.0%2-甲基-1-基-2- ≥97%格列美脲(標(biāo)準(zhǔn)品)

趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA試劑盒己葉酯 98%橡苔 98%格列美脲

趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒己葉酯 98%,Kosher 甲基庚烯酮 98%灰黃霉

趨化因子26(CCL26)ELISA試劑盒正庚 Standard for GC,>99.5%(GC)二甲基丁葉酯 98%灰黃霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

趨化因子2(CXCL2)ELISA試劑盒正庚 99%二甲基丁葉酯 ≥98%, FCC, Kosher透明質(zhì)鈉;玻璃鈉

趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒正庚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)麥芽酚 ≥98.5%,natural, FG

趨化因子(FK)ELISA試劑盒乙正己酯  99%橙花叔 97%, Mixture of cis and trans(標(biāo)準(zhǔn)品)

趨化因子(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒乙正己酯 CP,98%橙花叔 ≥97.0%,Mixture of cis and trans, FCC氫右美沙芬

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員27(KIF27)ELISA試劑盒乙正己酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC) 椰子 98%, FCC, Kosher氫右美沙芬(標(biāo)準(zhǔn)品)

清道夫受體類(lèi)B成員1(SCARB1)ELISA試劑盒葉酯  97%橙花   97%富馬伊布利特

清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒柳己酯 98%乙位萘乙 99%富馬伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)

輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)ELISA試劑盒己異戊酯  98%乙位萘乙 食品級(jí),Kosher硫異帕米星

青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒異戊異戊酯 98%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)蓓薩羅丁;貝沙羅汀

親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA試劑盒異丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)正壬 96%蓓薩羅丁(標(biāo)準(zhǔn)品)

切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒異丁 ≥99%, FCC正壬 ≥95%, FCC, Kosher, FG酮洛芬

鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA試劑盒異戊 98%3,6-壬二烯 97%酮洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)


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