詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013381
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
MAP-2/FITC 熒光標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS1 整合樣金屬蛋白與1型抗體 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880) 磷化谷受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
T7 tag/FITC 熒光標(biāo)記T7 tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
BECN1/FITC 熒光標(biāo)記一種抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標(biāo)記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK6 細(xì)胞角蛋白6抗體 0.1ml
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原 0.5mg
Rabbit IgG heavy chain constant region 兔抗人γ-鏈 0.1ml
Rhesus antibody Rh TRAF7 壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標(biāo)記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GPD1 甘油三磷脫氫1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD40 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml
Integrin Alpha2/CD49b/FITC 熒光標(biāo)記整合α2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
RPS6/FITC 熒光標(biāo)記S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: K Lancefield培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
米曲霉種屬: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;。產(chǎn)糖化,淀粉,酒精糖化菌。培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件: 25-28℃,好氧存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 5 V 7...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
黃微球菌種屬: Micrococcus│flavus分離基物: 沉積物/活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
周期依賴性激1(CDK-1)ELISA試劑盒甲 無級(jí), 99.8%乙乙酯 AR,99%聯(lián)芐唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒乙基叔丁基 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙乙酯 for HPLC, >99.0%(GC)膽紅(標(biāo)準(zhǔn)品)
重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒4-叔丁基吡啶 98%甲溶液 AR,含10-15% 甲穩(wěn)定劑膽紅
重去甲腎上腺(NE-B)ELISA試劑盒鄰二甲丁芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 Standard for GC,>99.9%比伐盧定(TFA)
腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒甲 Standard for GC,≥99.5%(GC)甲 AR,99.5%比馬前列腺/貝美前列
腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒聚氧乙烯月桂 高純級(jí),Brij-35甲 CP,99.5%比馬前列腺/貝美前列(標(biāo)準(zhǔn)品)
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒2-溴乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 AR,無級(jí)鹽平陽霉
腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA試劑盒2-溴-5-氟吡啶 99%甲 for HPLC, ≥99.9%硫博萊霉/博來霉/爭光霉
腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒溴代硝 90%甲 農(nóng)殘級(jí), ≥99.9%替佐米/保特佐米
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒雙(4-)酯 99%甲 ≥99.9%(GC)替佐米(標(biāo)準(zhǔn)品)
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒2-環(huán)己基溴乙 98%甲 ACS博舒替尼
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)基因6蛋白(TNFAIP6)ELISA試劑盒5-溴-2-氟 97%甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%布地奈德
腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA試劑盒5-溴-5-硝基-1,3-二惡 98%甲 電子級(jí)布地奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)
腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒Nα-甲酰-DL-精氨酰-β-萘 97% 甲 ACS 光譜級(jí), ≥99.9%亞葉鈣
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒赫斯特?zé)晒馊剂希?3258 98%甲 LC-MS,≥99.9%亞葉鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試劑盒并[e]芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 色譜級(jí)+, ≥99.9%喜樹
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。