詳細(xì)介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013390 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
(NF-κB)ELISA Kit 大鼠核因子κBMulti-class antibodies: 48T
SYVN1 滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.3ml
SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原 96T
NFIA 核因子1A抗體 0.1ml
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 0.1ml
SYVN1 滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
BB-Ab(Human B burgdorleri antibody) ELISA Kit 人抗BB抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-27R/TCCR 白細(xì)胞介27受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LTBP4 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白4抗體 0.2ml
BSP(Human bone sialoprotein) ELISA Kit 人骨涎蛋白 96T
RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 0.1ml
Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷化周期B1抗體 0.1ml
IL-27R/TCCR 白細(xì)胞介27受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GPR92 G蛋白偶聯(lián)受體GPR92蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKS3 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml
Inhibin Alpha/FITC 熒光標(biāo)記抑制α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
ROCK2/FITC 熒光標(biāo)記Rho相關(guān)蛋白激2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
亞洲柑桔黃龍病菌PCR試劑盒銅綠假單胞菌種屬: Pseudomonasaeruginosa(Schroeter)Migula安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 敏感試驗(yàn)質(zhì)控菌株培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 37℃
強(qiáng)壯類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│validus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 721生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
米曲霉種屬: Aspergillus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)蛋白培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 25~28℃存儲(chǔ)條件: 礦物油法;定期移植法
非O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae non-O1提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 吸收及檢定霍亂診斷血清用 非O1培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
幽門螺桿菌相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒二乙二二乙 for HPLC, ≥99%亞麻 ~70% (GC) ,天然鹽格拉司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)
優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒重氮乙乙酯 91%,≤10% dichloromethane鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)氫噻
硬骨(SOST)ELISA試劑盒4-羥基-環(huán)己甲乙酯 98%鈦異酯 98%氫噻(標(biāo)準(zhǔn)品)
印度猬因子(IHH)ELISA試劑盒3-甲?;?2-乙酯 97%鈦四乙酯 33-35% TiO2 醋
隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒扁豆 ≥98.0%硅藻土 CP醋(標(biāo)準(zhǔn)品)
吲哚2,3-雙加氧(IDO)ELISA試劑盒扁豆 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-巰基 98%鹽伊達(dá)比星
音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒2-乙基-1,3-己二 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-巰基 99%,用于生化分析甲磺伊馬替尼
音猬因子(SHH)ELISA試劑盒1,2-環(huán)氧十二 95%3-巰基甲酯 98%甲磺伊馬替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)
抑制β-B(Inhbb)ELISA試劑盒乙基 99.8%,無(wú)級(jí)2,4-二甲 99%咪喹莫特
抑制β-A(INHBA)ELISA試劑盒鉻藍(lán) Indicator2,3-二 98%咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品)
抑制B(INH-B)ELISA試劑盒反式-4-甲氧基肉桂異辛酯 98%三異 90%伊立替康
抑制A(INH-A)ELISA試劑盒麥角考寧 95% Standard for GC,≥99.9% (GC) 伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)
抑制(INH)ELISA試劑盒β-硫丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品 AR, ≥99.5%鹽伊立替康,(CPT-11)
抑肽(AP)ELISA試劑盒EPA 酚類混合物 phenl Mix 80 9個(gè)品種2000ng/μl異溶液 CP, ≥99.0%鹽伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)
抑瘤M(OSM)ELISA試劑盒L-乙硫氨 99% ACS, ≥99.0%硝異康唑
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)ELISA試劑盒2-乙炔 98%甲中標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品硝異康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)