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轉基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 10:26:36瀏覽次數(shù):245

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013392 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
轉基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒的銷售產(chǎn)品:Rac1 (Phospho-Ser71) Antibody
Raf1 (Phospho-Ser338) Antibody
MEK1/MEK2 (Phospho-Ser217/Ser221) Antibody

詳細介紹

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

轉基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒

50次

FS-P013392

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

sIL-6R ELISA Kit 大鼠可溶性白介6受體Multi-class antibodies: 48T

 SYT3 突觸結合蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat  Guinea pig IgG/APC APC標記的羊抗豚鼠IgG  0.1ml

ET ELISA Kit 大鼠內 96T

NFIB 核因子1B抗體 0.2ml

Aggrecan 短蛋白聚糖抗體 0.2ml

 SYT3 突觸結合蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

GS-ANA(Human granulocyte specific antinuclear antibody) ELISA Kit 人粒細胞特異性抗核抗體Multi-class antibodies: 48T

 IGFBP2 胰島樣生長因子結合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MALT1 粘膜相關組織瘤轉運蛋白1抗體  0.2ml

Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b 96T

RAB40B RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 0.2ml

Cathepsin K 組織蛋白K抗體 0.1ml

 IGFBP2 胰島樣生長因子結合蛋白2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

G gamma14 G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ankyrin B/Ankyrin brain 錨定蛋白B抗體  0.2ml

 IMP3/FITC 熒光標記胰島樣生長因子ⅡmRNA結合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG  0.1ml

 RNF148/FITC 熒光標記環(huán)指蛋白148抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
轉基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒克魯斯假絲酵母種屬: Candida krusei提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 高溫生香酵母。培養(yǎng)基: 5 °Bé麥芽汁瓊脂:5°Bé麥芽汁 1.0L,瓊脂 15.0g,自然pH。121℃,15min。生長條件: 28-30℃,好氧存儲條件: 真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

芽孢八疊球菌種屬: Sporosarcina│sp.分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 潛在的新種培養(yǎng)基: 221生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

異型酒香酵母種屬: Brettanomycesanomalus安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 用于酒精發(fā)酵培養(yǎng)基: 13(麥芽汁)生長條件: 25-28℃

異鎖鏈(IDES)ELISA試劑盒固紅TR半化鋅鹽 90%聚乙二單甲 平均分子量1000來曲唑

異檸檬脫氫(ICD)ELISA試劑盒固紫B鹽 80%蒽酮 AR來曲唑(標準品)

異常原(APT)ELISA試劑盒N-甲酰-L-甲硫氨酰-L-白氨酰-L氨 97%N-乙酰-D-半乳糖,合 98%醋亮瑞林

異腎上腺(iso-Hyd)ELISA試劑盒(S)-(-)-2-甲酰琥珀酐 90%,工業(yè)級偶氮二甲二異酯 95%左乙拉西坦

乙酰乙(ACAC)ELISA試劑盒D-果糖-6-二鈉,二 98%偶氮二甲二叔丁酯 98%左乙拉西坦(標準品)

乙酰肝(HPA)ELISA試劑盒鈣熒光探針FIuo,3-AM 70%4,4-二溴聯(lián)  98%鹽林可霉

乙酰輔A羧化合成(ACC)ELISA試劑盒熒蒽 分析標準品3'-羥基乙酮 98%鹽林可霉(標準品)

乙酰酯(AChE)ELISA試劑盒D-半乳糖 分析標準品硫新霉 USP級,680 I.U./mg三代甲狀腺鈉鹽

乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒羥基乙酰 98%土霉  97%鹽洛美沙星

乙酰(ACH)ELISA試劑盒三油甘油酯 99%異酯 99%(劇品)鹽洛美沙星(標準品)

乙脫氫18家族成員A1(ALDH18A1)ELISA試劑盒戊二酰 97%鄰硝 99%替潑諾

乙脫氫(ALDH)ELISA試劑盒甘草次(α型) 分析標準品,>98%對硝 99%替潑諾(標準品)

乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA試劑盒N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘 BR間硝 CP洛伐他汀

乙脫氫(ADH)ELISA試劑盒L-甘油鈣鹽,一 97%間硝 分析標準品洛伐他汀(標準品)

乙呋酮(AD)ELISA試劑盒DL-甘油 90%間硝 standard for GC, ≥99.5% (GC)盧比前列腺/盧比前列酮

胰脂肪(PL)ELISA試劑盒甘氨脫氧膽 97%間硝標準溶液 1000μg/ml,溶劑:甲賴氨加壓;賴氨加壓
PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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