化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：PCR級甜菜堿溶液，5M
產(chǎn)品貨號：FS-P013293
產(chǎn)品規(guī)格： 1.5 mL
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
8-OHdG ELISA Kit 大鼠8羥基脫氧鳥苷Multi-class antibodies： 48T
TGF-Beta 1 轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GNLY/NKG5 顆粒溶抗體 0.2ml
FSH(mouse follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 小鼠促卵泡 96T
NNP1 新型核蛋白質(zhì)1抗體 0.2ml
Bcl-2 alpha Bcl2 alpha蛋白抗體 0.2ml
TGF-Beta 1 轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
IL-2sR Alpha/CD25(Human soluble interleukin-2 receptor) ELISA kit 人白介2可溶性受體α鏈Multi-class antibodies： 48T
GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Bov IgG 小鼠抗IgG 1mg
AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit 人通道蛋白1 96T
RbAp48 視網(wǎng)膜母細胞瘤結合蛋白P48抗體 0.2ml
CLPS 胰輔脂抗體 0.2ml
GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit human IgM/Bio 生物標記的兔抗人IgM 0.3ml
GLYR1 氧化還原GlyR1/核蛋白60抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALOX15B/15 Lipoxygenase 2 花生四烯15脂氧合2抗體 0.2ml
KLK4/FITC 熒光標記激肽釋放4抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Slit2/Slil3/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PCR級甜菜堿溶液，5M小鼠磷化腺苷活化蛋白（AMPK）elisa檢測試劑盒
小鼠α葡萄糖苷（α-Glu）elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1（sPECAM-1/sCD31）elisa檢測試劑盒
小鼠腫瘤蛋白53（TP53）elisa檢測試劑盒
小鼠酪（TRY）elisa檢測試劑盒
小鼠αL-艾杜糖苷（IDUA）elisa檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)衍生因子2（SDF2）elisa檢測試劑盒
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）elisa檢測試劑盒
小鼠尿型纖溶原活物受體（PLAUR/uPAR）elisa檢測試劑盒
小鼠垂體腺苷環(huán)化活肽27（PACAP-27）elisa檢測試劑盒
小鼠白介1可溶性受體Ⅰ（IL-1sRⅠ）elisa檢測試劑盒
小鼠甲狀腺結合球蛋白（TBG）elisa檢測試劑盒
小鼠組織型纖溶原活劑（t-PA）elisa檢測試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)錄因子20（TCF20）elisa檢測試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
化工儀器網(wǎng)