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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：細(xì)小病毒B19 染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013536
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
LAG-3/CD223/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞活化基因-3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SOD1/FITC 熒光標(biāo)記超氧化物歧化1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1A1 乙醇脫氫1抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) 磷化糖皮質(zhì)受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SOD1/FITC 熒光標(biāo)記超氧化物歧化1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)Multi-class antibodies： 48T
MMP-10 基質(zhì)金屬蛋白-10抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 5 整合β5抗體 0.1ml
RV(Human rabies virus antibody) ELISA Kit 人抗狂犬病毒抗體 96T
Proteasome 20S alpha 6 蛋白體PSMα6抗體 0.2ml
C7orf64 7號(hào)染色體開放閱讀框64抗體 0.2ml
MMP-10 基質(zhì)金屬蛋白-10抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GBP6 G蛋白結(jié)合蛋白6體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSA 芳香基酯1抗體 0.2ml
IFABP/FITC 熒光標(biāo)記小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.3ml
PKR/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激R/雙鏈RNA依賴蛋白激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
細(xì)小病毒B19 染料法熒光定量PCR試劑盒50次蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
施氏葡萄球菌凝集亞種種屬: Staphylococcusschleiferisubsp.coagulans分離基物: Canineexternalearotitis安全等級(jí): 1模式菌株: yes生長(zhǎng)條件: 37℃
豌豆根瘤菌種屬: Rhizobiumlegumiunosarum(Frank)Frank安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 9生長(zhǎng)條件: 25-28℃
穗產(chǎn)色鏈霉菌種屬: Streptomyces│racemochromogenes提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain. Produces racemomycine complex, strept培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
胞漿型脂A2(cPLA2)ELISA試劑盒3-[(3-膽固氨基)二甲基氨基]-1-磺 98%吡啶-3，4-二羧 98%次硝鉍(>98%,BR)
胞漿球蛋白(CIg)ELISA試劑盒2-環(huán)己基乙磺 ≥99.0% (T)2,6-吡啶二甲 97%碳酐>3000U/mg
伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒4--7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑 98%4-甲磺酰異酯 96%羧肽 B >170 U/mg
半乳糖凝集7(Gal-7)ELISA試劑盒9，9-二甲基-2，7-二溴芴 98%2-(三乙酰)吡咯 99%碳鈷(II)(>98~102%,BR)
半乳糖凝集3(Galectin3)ELISA試劑盒二硫蘇糖 99%鹽多巴 98%硝銅三(>99%,BR)
半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于分子生物學(xué), ≥99%（±）-α-煙酚2'-脫氧脫氧胸苷-5'二三鈉鹽
半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒二硫蘇糖 用于電泳, ≥99%反二 CP，99.0%半乳糖氧化(活：> 30 U/mg，BC)
半胱氨蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)ELISA試劑盒1,8-二氮-9-芴酮 99%碳胍 99%3-吲哚(>99%,植物級(jí))
板層相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒N,N'-二環(huán)己基-4-嗎啉脒 98%異抗壞血鈉 98%草亞鐵二(>99%,BR)
瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒DNA ≥300 Kunitz units/mg protein三氧化二銻 SP硝鑭六(>99%,BR)
白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯(lián) 99%三氧化二銻 99.99% metals basis化鉛(>99%,BR)
白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒3,3'-二氨基聯(lián) 97%三氧化二銻 AR，99.5%檸檬鋰四(>98%,BR)
白酯(LE)ELISA試劑盒2,7-二溴芴酮 96%三氧化二銻 99.9%，平均粒徑：0.7 µm4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷
白調(diào)節(jié)(LR)ELISA試劑盒2,6-二酚靛鈉鹽 AR三氧化二銻 99.999% metals basis4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖苷
白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒3,5-二-2-羥基磺鈉 99%三氧化二銻 CP，99%4-甲基傘花基鈉三
白抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒 3,3'-二氨基聯(lián)四鹽鹽合物 98%β-氨乙酯鹽鹽 98%萘(>98%，BC)
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