參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒野生株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013602
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 人蝸同源物2Multi-class antibodies: 48T
Slc4a7/Nbcn1 碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rat IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B細(xì)胞瘤
NT-3 神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體 0.1ml
BMI1 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體 0.1ml
Slc4a7/Nbcn1 碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
HTLV- I (Human T-lymphotropicvirus I ) ELISA Kit 人類嗜T細(xì)胞Ⅰ型病毒Multi-class antibodies: 48T
IRS-2 胰島受體底物-2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LEPREL2 皮屑樣蛋白2抗體 0.2ml
T(Human Testoterone) ELISA Kit 人睪酮 96T
presenilin 2 早老蛋白-2抗體 0.1ml
C1Q 補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體 0.2ml
IRS-2 胰島受體底物-2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
GYG1 糖原蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ATE1 精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體 0.2ml
HOXA10 /FITC 熒光標(biāo)記HOXA10抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC 熒光標(biāo)記抗磷化致癌基因C-Myc抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬瘟病毒野生株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi E7 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
枯草芽孢桿菌種屬: Bacillus│subtilus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)肌苷。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
綠色木霉種屬: TrichodermaviridePersoon:Fries安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 纖維活性較高培養(yǎng)基: 14,17生長條件: 25-28℃
單核細(xì)胞增生利斯特氏種屬: Listeria│monocytogenes提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 4b培養(yǎng)基: CM0110生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白8(LCN8)ELISA試劑盒D-核糖 用于植物培養(yǎng),≥99%(HPLC)4-(反-4-戊基環(huán)己基)甲 99%玫紅(指示劑級)
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白6(LCN6)ELISA試劑盒烯, CP,>98%(GC)咪唑煙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.000mol/L(1N))
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(LCN15)ELISA試劑盒液體石蠟 CP柄曲菌 分析標(biāo)準(zhǔn)品氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.5000mol/L(0.5N))
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(LCN12)ELISA試劑盒液體石蠟 輕質(zhì)、密度:0.84-0.86檸檬鐵 AR氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.2000mol/L(0.2N))
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(LCN10)ELISA試劑盒液體石蠟 重質(zhì)、密度:0.86-0.89氨 for HPLC,≥25% in H2O氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1000mol/L(0.1N))
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)ELISA試劑盒啉 AR,99%氨 ACS, 28.0-30.0% NH3 in water草鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
脂3(LPIN3)ELISA試劑盒1,3,5- CP,97%氨 ≥28% NH3 in H2O,電子級硝銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1017mol/L)
脂2(LPIN2)ELISA試劑盒1,2,4,5-四 98%異 P子級硝銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1000mol/L(0.1N))
脂1(LPIN1)ELISA試劑盒1,2,4,5-四 95%鄰氨基酚 98%硝銀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.01000mol/L(0.01N))
脂生蛋白(ADIG)ELISA試劑盒1,2,4,5-四 NMR定量標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)鄰氨基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%百里香酚藍(lán)(IND)
脂解激活脂蛋白受體(LSR)ELISA試劑盒1,2,3- 91%鄰氨基酚 99%百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %)
脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒1,2,3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-氨基吡啶 99%喹哪啶紅
脂肪膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP)ELISA試劑盒1,2,4- 98%2-氨基-4-酚 97%酚酞(98%)
脂肪轉(zhuǎn)移2(LIPT2)ELISA試劑盒1,2,4-標(biāo)準(zhǔn)溶液 1mg/ml ,用于質(zhì)分析2'-氨基乙酮 97%四溴酚藍(lán)
脂肪轉(zhuǎn)移1(LIPT1)ELISA試劑盒1,2,4- 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-氨基-4-酚 98%百里香酚酞
脂肪去飽和3(FADS3)ELISA試劑盒1,2,4- Standard for GC,≥99.5% (GC)5-氨基吲哚 97%釷試劑
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。