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詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：無乳鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013461
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human ALR ELISA Kit 人肝再生增強因子Multi-class antibodies： 96T
SSTR4 生長抑受體4抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM 羊抗人IgM 1mg
Human c-fos ELISA Kit 人c-fos 96T
NFAT4 核因子活化T細胞胞漿蛋白3抗體 0.2ml
BCL6B BCL6B抗體 0.1ml
SSTR4 生長抑受體4抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
SEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit 人硒蛋白1Multi-class antibodies： 48T
MK1/2(MAPKK1) 原活化蛋白激激1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KCNC4/KV3.4 離子通道蛋白Kv3.4抗體 0.2ml
Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit 人腮腺炎病毒IgM 96T
PTCHD2 多通道膜蛋白PTCHD2抗體 0.2ml
CENPP 著絲粒蛋白P抗體 0.2ml
MK1/2(MAPKK1) 原活化蛋白激激1抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit rat IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GDF1 生長分化因子1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOD 載脂蛋白D抗體 0.2ml
IL-6/FITC (mouse、rat) 熒光標(biāo)記白介6抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
Melamine/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記三聚胺單克隆抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
無乳鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒金黃色葡萄球菌種屬: Staphylococcus│aureus提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物；凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測芯片培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
西弗冠孢酵母種屬: Stephanaascus│ciferrii分離基物: 豬盲腸提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0436生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法
Amycolatopsisdecaplanina種屬: Amycolatopsisdecaplanina分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 158生長條件: 28℃
運動發(fā)酵單胞菌種屬: Zymomonas│mobilis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 酒精。培養(yǎng)基: CM0199生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
化腺苷活化蛋白激(AMPK)ELISA試劑盒2,5-二噻吩 98%氫氧化鋁 99.99%，2～10μm利拉萘酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)ELISA試劑盒3,4-二甲氧基噻吩 97%氫氧化鋁 99.99%，0.05～1.5μm萘普生鈉
化糖原合激3β(pGSK3B)ELISA試劑盒3-甲氧基噻吩 98%納米氧化鎂 50nm,球形,99.9% metals basis萘普生鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）
化糖原合成激3(pGSK-3)ELISA試劑盒2-甲氧基噻吩 99%二氧化鋯 99.99% metals basis，D50：0.2～0.4μm齊多夫定
化肌球蛋白輕鏈(PMLC)ELISA試劑盒2-硝基噻吩 98%納米氧化鋅 99.9% metals basis，30±10nm齊多夫定（標(biāo)準(zhǔn)品）
化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒四溴噻吩 99%5-氨基乳清 98%尼可地爾
化蛋白激C(P-PKC)ELISA試劑盒噻吩-2,3-二甲 98%1,3-二甲基-5-吡唑酮 96%尼可地爾（標(biāo)準(zhǔn)品）
化蛋白激B(P-PKB)ELISA試劑盒鹽胍 分子生物學(xué)級，99.5%0.99煙
化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)ELISA試劑盒鹽胍 99.5% 分析標(biāo)準(zhǔn)品利福平；利發(fā)霉
甘油變位2(PGAM2)ELISA試劑盒鹽胍 蛋白變性，99.5%0.92利福平(標(biāo)準(zhǔn)品)
趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒鹽胍 AR,99.0%鹽金剛 99%ε-聚賴氨
抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒鹽胍 CP,98.0%鹽金剛 99%普羅雌烯
功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒硫胍 99%D-氨甲酯鹽鹽 98%波生坦(合物)
功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒聚烯酰 非離子型，分子量：200萬-1400萬甲氧羰酰琥珀酰亞 98%波生坦合(標(biāo)準(zhǔn)品)
β(LTB)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 97%抑肽 3-8 TIU/mg福沙吡坦二甲葡(MK-0517)
α(LTA)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品α-糜蛋白 1000 usp u/mg普拉格雷
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