詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013462 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Leptin/FITC 熒光FITC標(biāo)記瘦抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SSTR3/FITC 熒光標(biāo)記生長抑受體3(SSTR3)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
PCDHGA1 原鈣粘蛋白γA1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSTR3/FITC 熒光標(biāo)記生長抑受體3(SSTR3)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit 人腎損傷分子1Multi-class antibodies: 48T
phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷化-原活化蛋白激p38抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh human Fibrinogen 羊抗人纖維蛋白原抗體 0.1ml
BNP ELISA Kit 大鼠腦鈉/腦鈉尿肽 96T
PTBP2 核糖核結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
CT74 /抗原74抗體 0.2ml
phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷化-原活化蛋白激p38抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
GLK 葡萄糖激抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 0.1ml
IL-6/FITC 熒光標(biāo)記白介6抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PS-1(CT)/FITC 熒光標(biāo)記早老蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬鏈球菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒巴斯德畢赤酵母種屬: Pichia│pastoris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 外源基因高效穩(wěn)定表達(dá)培養(yǎng)基: 312生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
豇豆慢生根瘤菌種屬: Bradyrhizobiumsp安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 9生長條件: 28-30℃
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 耐高糖。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
肉毒梭菌種屬: Clostridium│botulinum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 強(qiáng)毒 D培養(yǎng)基: CM0121生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒2,4-二氧乙標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L,基體:甲色C 95%鹽可樂定
亮氨酰-半胱氨酰氨肽(LNPEP)ELISA試劑盒2,5-二氧乙標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,溶劑:甲DNA ≥300 Kunitz units/mg protein鹽可樂定(標(biāo)準(zhǔn)品)
亮氨酰氨基肽(LAP)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 用于植物培養(yǎng), ≥98%(GC)DNA ≥2,000 Kunitz units/mg protein2-甲氧基雌二(進(jìn)分)
亮氨富含重復(fù)絲氨/蘇氨蛋白激2(LRRK2)ELISA試劑盒過氧化脲 97%彈性蛋白 30 units/mg2-甲氧基雌二
亮氨氨基肽3(LAP3)ELISA試劑盒銨 AR,99.0%透明質(zhì) ≥ 300 IU/mg2-甲氧雌二(標(biāo)準(zhǔn)品)
鏈激(SK)ELISA試劑盒洗石棉 AR辣根過氧化物 RZ:>3.0,活性:>250 IU/mg鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明
連蛋白(zonulin)ELISA試劑盒洗石棉 CP辣根過氧化物 RZ:>2.5,活性:>200 IU/mg鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明(標(biāo)準(zhǔn)品)
粒特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒無硫鈣 AR,97.0%辣根過氧化物 RZ:>2.0,活性:>160 IU/mg頭孢哌酮鈉
粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒無硫鈣 ≥99.99% metals basisRZ:1.5 RZ:>1.5,活性:>100 IU/mg 頭孢哌酮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
粒巨噬集落激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA試劑盒鋁 CP辣根過氧化物 RZ:>3.0,活性:>300 IU/mgN-芐基甘氨
粒巨噬集落激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒硬酯鋁 CP核糖核 ≥ 50 Kunitz units/mg扎那米韋
粒集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒硫氫銨 AR胰蛋白(牛胰臟) potency ≥2500 units/mg扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒溴 ACS, 99.5%鄰甲酚 99%去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷
利鈉肽(ANP)ELISA試劑盒芐基基溴化銨 98%間甲酚 99.7%,無色醋甲唑
肽(KP)ELISA試劑盒鉻鋇 AR,98.0%間甲酚 Standard for GC,≥99.7%(GC)醋甲唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 AR間甲酚 CP齊拉西酮
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。