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豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 14:32:55瀏覽次數(shù):318

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013603 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:111-83-11-溴代辛烷體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒
溶藻細菌體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒
異綠原酸CCAS:32451-88-0活體細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)
62499-27-8標準品冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013603

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

PFK2/PFKFB3 /FITC 熒光標記6磷果糖激2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光標記碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Alpha-ENaC 鈉通道蛋白α ENaC  0.2ml

Rabbit  human IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgM 0.1ml

GNPNAT1 葡萄糖6-N-乙酰基轉(zhuǎn)移1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Guinea pig IgM/FITC FITC標記的兔抗豚鼠IgM  0.3ml

 Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光標記碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳脫氫Multi-class antibodies: 48T

 MyD88 髓樣分化蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Importin 9/RanBP9 核蛋白9抗體(Ran結(jié)合蛋白M)  0.2ml

sCD30L ELISA Kit 大鼠可溶性CD30配體 96T

presenilin 1 早老蛋白-1抗體 0.1ml

CCDC64 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體 0.1ml

 MyD88 髓樣分化蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Mouse  human IgG(3D3)/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml

Glycogen synthase 2 葡萄糖合成2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)  1ml

 HO-2/FITC 熒光標記血紅氧合-2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  mouse IgG-Fc/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG-Fc  0.1ml

 phospho-c-Raf (Ser338) /FITC 熒光標記磷化原癌基因c-Raf抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒西唐氏鏈霉菌種屬: Streptomyces│setonii分離基物: 馬鈴薯瘡痂提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

淤泥假單胞菌種屬: Pseudomonas│caeni分離基物: 厭氧氨氧化反應(yīng)器的污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 820生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

擬粉紅鎖擲孢酵母種屬: Sporidiobolus│pararoseus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of S. jaonica培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

類阿達青霉種屬: Penicillium│adametzioides分離基物: 土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0072生長條件: 25℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

脂肪去飽和2(FADS2)ELISA試劑盒N-芐基異 97.0%3-氨基, 包含0.1%碳穩(wěn)定劑, 98%鈦鐵試劑(AR)

脂肪去飽和1(FADS1)ELISA試劑盒巴豆 98%鄰氨基對叔丁基酚 98%鈦鐵試劑(95%)

脂肪合(FASN)ELISA試劑盒巴豆 Standard for GC,≥99.9% (GC)鄰硝基對叔丁基酚 98%四溴酚酞乙酯鹽

脂肪N(LIPN)ELISA試劑盒巴豆甲酯 98%2,6-二乙基  98%金蓮橙O

脂肪M(LIPM)ELISA試劑盒維生A 98%2,6-二異基 90%四羥基-對-醌二合物

脂肪K(LIPK)ELISA試劑盒維生A 分析標準品8-羥基喹啉 AR,99.0%對二甲酚藍

脂肪J(LIPJ)ELISA試劑盒(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧  97%5-硝基-8-羥基喹啉 97%鋅試劑(AR)

脂肪I(LIPI)ELISA試劑盒旋光管 PRG-100-E鄰硝基對甲酚 98%鋅試劑(≥85%(HPLC))

脂肪H(LIPH)ELISA試劑盒甘草  93%2-甲基-6-乙基 98%1,3-二甲基-5-吡唑酮

脂筏特征蛋白2(FLOT2)ELISA試劑盒羥基纖維 I型,粘度:4000mPa.s鄰酚 AR,98%氟啶(標準品)

脂筏特征蛋白1(FLOT1)ELISA試劑盒羥基纖維 I型,粘度:20000mPa.s2-酚 99%氟節(jié)(標準品)

脂蛋白脂(LIPD)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:100mPa.s2-酚 分析標準品,>99.7% (GC)吡脲(標準品)

脂蛋白關(guān)聯(lián)脂A2(LpPLA2)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:400mPa.s2-乙酮 95%氟吡氧乙(標準品)

脂蛋白a(Lpa)ELISA試劑盒羥基纖維 II型,粘度:100000mPa.s5-硝基吲哚 98%麥穗寧(標準品)

正五聚蛋白3(PTX3)ELISA試劑盒甲基纖維 15mPa.s乙酮 CP,98%標準溶液(100μg/m,u=6~2%,酮)

正輔因子4(PC4)ELISA試劑盒甲基纖維 400mPa.s烯基縮甘油 99%氟戊菊酯標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)


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