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禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 11:08:07瀏覽次數(shù):172

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013449 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯CAS:5058-13-9動(dòng)物扁桃腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
干擾素誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體動(dòng)物腫瘤組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
吸水鏈霉菌人體NK細(xì)胞分離試劑盒
雞硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒樣本結(jié)晶紫細(xì)胞群落染色試劑盒

詳細(xì)介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013449

 

QQ截圖20201022162313.png 

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

LFABP/FABP-2 /FITC 熒光標(biāo)記肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 STAT2/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AFP 甲胎蛋白AFP抗體  0.1ml

Rabbit  Guinea pig IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

Gibberellins 磺/β-基乙磺抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗狗IgG  0.3ml

 STAT2/FITC 熒光標(biāo)記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體Multi-class antibodies: 48T

 Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KIF17 驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17抗體  0.2ml

T ELISA Kit 大鼠睪酮 96T

PTK9 蛋白酪激9抗體 0.2ml

phospho-CDKN2A (Ser8) 磷化抑癌基因p16抗體 0.1ml

 Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷化丙酮激M2抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rabbit  rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.3ml

GAPDH 3-磷甘油脫氫(兔來源組化用抗體) 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOA1 載脂蛋白A1抗體  0.1ml

 IL-11/FITC 熒光標(biāo)記白介11抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記兔抗人IgA  0.1ml

 Patched/PTCH /FITC 熒光標(biāo)記Hh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑膜蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
禽副粘病毒4型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒丁香假單胞菌種屬: Pseudomonas│syringae分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維、植、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法

藤黃色土生單胞菌種屬: Terrimonas│lutea提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

串珠鐮孢種屬: FusariummoniliformeSheldon安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 九二0產(chǎn)生菌培養(yǎng)基: 14,17生長條件: 25-28℃

凝結(jié)芽孢桿菌種屬: Bacilluscoagulans分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 104生長條件: 37℃

原前體蛋白(PIVKA-II)ELISA試劑盒正  ACS, ≥99.5%2,7-二溴芴 98%睪酮,

原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒正 分析標(biāo)準(zhǔn)品1,4-二酞 98%睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)

(PT)ELISA試劑盒正 農(nóng)殘級4,4'-二聯(lián) 98%鹽丁卡因

血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)ELISA試劑盒 AR,≥99.5% (GC) 9-芴甲 99% 鹽丁卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)

受體(TR)ELISA試劑盒 ≥99.5%, FCC, FG雙酚芴  98%甲唑啉鹽鹽/鹽妥拉唑林

敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒松油,異構(gòu)體混合物,CP(R)-3-(3-氟基)-5-羥甲基惡唑-2-酮 98%托特羅定

抗復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒正戊 CP,98%(S)-N-[[3-(3-氟基)-2-氧代-5-惡唑基]甲基]乙酰 98%托特羅定(標(biāo)準(zhǔn)品)

(TM)ELISA試劑盒正戊  >99% (GC)高良姜 98%托吡酯

(Thrombin)ELISA試劑盒4,4,4-三氟乙酰乙乙酯 98%2-羥基-6-甲基吡 98%托吡酯(標(biāo)準(zhǔn)品)

凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒乙酰乙甲氧乙酯 96%4--1-甲基-1H-吡唑 97%VX-680/MK0457,陶扎色替

凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒石墨 99.95% metals basis4--1H-咪唑 97%曲司銨

凝聚(CLU)ELISA試劑盒石墨 99%,40nm1-(2-乙基)-2-甲基-5-硝基-1H-咪唑 98%AG-014699

凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒石墨 CP,99.85%1-甲基-D-色氨 96%卡非佐米

尿腫瘤壞死因子相關(guān)誘導(dǎo)凋亡配體死亡受體4(TRAIL-DR4)ELISA試劑盒石墨 D50<400nm,99.95%2-磺酰 98%CEP-18770

尿游離皮質(zhì)(UFC)ELISA試劑盒石墨 99.95%,8000目(S)-2-硝基-6,7-二氫-5H-咪唑并[2,1-b][1,3]惡-6- 98%地馬格列

尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA試劑盒鐿 99.9%,塊狀吡唑-3-甲酰 97%鹽諾拉曲噻
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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