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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013463
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白Multi-class antibodies： 48T
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM whole serum 羊抗人IgM抗血清 1ml
CETP ELISA Kit 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白 96T
NANOGP8 干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體 0.2ml
BAP31 BAP31蛋白抗體 0.1ml
SSTR3 生長抑受體3抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgGMulti-class antibodies： 48T
Ku-80 DNA修復(fù)Ku-80抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2抗體 0.1ml
GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)受體α 96T
PTBP1 核糖核結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Cyclin B3 周期B3抗體 0.2ml
Ku-80 DNA修復(fù)Ku-80抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit pig IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
GPR78 G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 0.1ml
IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光標(biāo)記白介-5受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PS-1/FITC 熒光標(biāo)記早老蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬鏈球菌2型探針法熒光定量PCR試劑盒分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium cosmeticum提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium parmense提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究存儲條件: 真空冷凍干燥法
龜分支桿菌龜型亞種種屬: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
乙型副傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│paratyphi B提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 1var.3 1,4,5 b 1,2培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%間甲酚 >99.0% (GC)塞曲司特/西拉達(dá)司/塞拉司特
類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒溴 AR，99.5%間甲酚 >98.0%(GC)美托拉宗
類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒二硫化碳 ACS, ≥99.9%間甲酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)
類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒二硫化碳 for HPLC, ≥99.9%2-甲基-3- 98%西地尼布馬來鹽
類肌腱蛋白c(TNC)ELISA試劑盒銅片 AR,99.5% metals basis2-甲基-3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品西他列汀
類肌腱蛋白(TN)ELISA試劑盒化鎘 AR,99.5%鹽芐絲肼 98%維達(dá)列汀;維格列汀
類固抗體(SCA)ELISA試劑盒次鈣 technical grade二甲硝咪唑 97%維達(dá)列汀;維格列汀(標(biāo)準(zhǔn)品)
類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒線狀氧化銅 AR4-羥基 98%鄰乙酰楊/阿司匹林
類白抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒二磺鈉 IND甲硝唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.8%(GC)鄰乙酰楊/阿司匹林(標(biāo)準(zhǔn)品)
類白抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒二磺鈉 ≥97.0% (HPLC)甲硝唑 99%奧利司他（發(fā)酵）
類白抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒2,6-二-O-甲基-β-環(huán)糊精 98%2-溴-5-甲基噻吩 95%奧利司他（發(fā)酵）
類白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒1,2-環(huán)己二四乙(DCTA) AR,97.0%4-溴-2-甲基噻吩 98%鹽尼卡地平
類白抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒反式-1.2-環(huán)己二四乙 98%2-乙基噻吩 97%鹽尼卡地平（標(biāo)準(zhǔn)品）
雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒二安替比林 AR2-羥基-5-硝基吡啶 98%維地平丁酯/丁維地平
酪氨酰tRNA合成(YARS)ELISA試劑盒二安替比林 CP2-硫脲嘧啶 98%孟魯司特鈉
酪氨酰DNA二酯1(TDP1)ELISA試劑盒二安替比林 98%2-硫脲嘧啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
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