詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品貨號:FS-P013529
產品規(guī)格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human elongin A,EloA ELISA Kit 人延伸蛋白AMulti-class antibodies: 48T
Sox2 胚胎干細胞關鍵蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
ASGPR(Human asialoglyco protein receptor) ELISA Kit 人去唾液糖蛋白受體 96T
Phospho-eNOS (Ser1177) 磷化一氧化氮合成3(內皮型)抗體 0.1ml
Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 0.2ml
Sox2 胚胎干細胞關鍵蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 人5羥色胺Multi-class antibodies: 48T
LIX1 LIX1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL8 Kelch樣蛋白8抗體 0.2ml
PGI(Human prostacycline) ELISA Kit 人前列環(huán) 96T
Protein A 重組金黃色葡萄球菌蛋白A抗體 0.1ml
Cullin 4B CUL4B蛋白抗體 0.1ml
LIX1 LIX1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗人IgG 0.1ml
GFM1 延伸因子G1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aromatase 芳香化抗體 0.1ml
IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 熒光標記抗大、小鼠IFN-γ抗IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗猴IgG 0.1ml
CD4/HRP 辣根過氧化物標記CD4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人皰疹病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒50次普通變形桿菌種屬: Proteus│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生代謝產物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
芽孢桿菌種屬: Bacillus│atrophaeus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 防霉。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
雌(E)ELISA試劑盒6-氨基-1-己 97%4-氟 99%油鈉(>98%,BR )
雌二受體(ER)ELISA試劑盒烯基基硅 98%1-氟-4- 98%四甲基化銨(>99%,BR)
雌二(E2)ELISA試劑盒丁炔二 98%4-氟酚 99%1-辛磺鈉(>98%,BC )
垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒4-溴-2-氟 99%4-羥基-環(huán)己甲乙酯 98%2,3,5三甲(>97%,植物級)
垂草扁桃(VMA)ELISA試劑盒甲基基硅 98%膽甲酯 97%3-吲哚丁(>98%,植物級)
串珠(HSPG2)ELISA試劑盒2,6-二氟 97%?;敲撗跄?98%乙鈣一(>98%,BR)
穿孔/成孔蛋白(PRF1/PFP)ELISA試劑盒炔乙酯 99%甘膽鈉 98%三鈣(>98%,BR)
穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒2-氟-4-羥基 99%甘氨脫氧膽鈉 97%DL-硒代蛋氨(USP)
穿孔(PF)ELISA試劑盒N-甲基-1-萘鹽鹽 97%鵝去氧膽鈉 97%蜜二糖
遲現(xiàn)抗原4(VLA4)ELISA試劑盒炔 98%膽鈉 98%草鈉(>98%,BC)
程序性死亡因子4(PDCD4)ELISA試劑盒三基銻 97%1-乙基-2-吡酮 99%鎢鈉二(>98%,BR)
程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA試劑盒2-(硅基)乙 98%γ -丁內酯 AR, ≥99%丁二酐(>98%,BR)
程序性死亡-1(PD-1)ELISA試劑盒海藻 CPγ -丁內酯 >99.9% (GC)四乙基化銨(>98%,BR)
成纖維生長因子8(FGF8)ELISA試劑盒海藻 藥用級N-甲基吡咯酮 AR,99.0%吐溫60
成纖維生長因子6(FGF6)ELISA試劑盒纖維粉 粒徑:90μmN-甲基吡咯酮 CP,98.0%甲噻;賽拉
成纖維生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒纖維粉 粒徑:50μmN-甲基吡咯酮 for HPLC, ≥99.5%酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。