注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:馬流產(chǎn)沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013550
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Beta-lactoglobulin/FITC 熒光標(biāo)記β-乳球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SNAP-25 /FITC 熒光標(biāo)記突觸相關(guān)蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKT/PKB 蛋白激B 0.1ml
Rabbit horse IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Gab1 接頭蛋白Gab 1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
SNAP-25 /FITC 熒光標(biāo)記突觸相關(guān)蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷Multi-class antibodies: 48T
Phospho-Numb (Ser276) 磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFN gamma 干擾-γ抗體 0.1ml
MOG ELISA Kit (human) 抗髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(人) 96T
Prostatic Acid Phosphatase 前列腺性磷抗體 0.2ml
COX7A2 氧化VIIA亞型2抗體 0.1ml
Phospho-Numb (Ser276) 磷化膜相關(guān)蛋白Numb抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCM2 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARTS 凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體 0.2ml
ICAM-1(CD54)/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞間粘附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM 兔抗猴IgM 1mg
PKC beta1/2/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激C beta抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
馬流產(chǎn)沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒擬青霉種屬: Paecilomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鈍齒棒桿菌種屬: Corynebacterium│crenatum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-異亮氨。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
暫無種屬: Hormoconis│resinae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 《GB/T 2423.16-2008 電子電工產(chǎn)品環(huán)境試驗(yàn) 第2部分:實(shí)驗(yàn)方法 試驗(yàn)J和導(dǎo)則:長霉》規(guī)定使用菌株。培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 24℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
β膠原交聯(lián)(bCTx)ELISA試劑盒異 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC)DL-蘋果 AR,99.5%四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)
β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)ELISA試劑盒異 >99.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)L-蘋果 98%酪氨脫羧
β-黑色(β-MSH)ELISA試劑盒異佛爾酮 97%L-蘋果 CP維多利亞藍(lán) R
β黑色(β-MSH)ELISA試劑盒異 ACS, ≥99.5% 順二 AR,99.5%α-酮戊二單鹽(>98%,BR)
β干擾(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒烯異癸酯 98%,含70-100ppm對(duì)二酚穩(wěn)定劑順二 CP,99%1-萘乙(>98%,BR)
β甘露糖苷(β Manase)ELISA試劑盒甲基烯月桂酯 96%順二 藥用級(jí),EP,USP1-環(huán)己基二乙單酰(>98%,BR)
β-防御3(β-BD-3)ELISA試劑盒α-甲基烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑D-蘋果 99%三氮唑(>98%,BR)
β-防御2(β-BD-2)ELISA試劑盒α-甲基烯 >99.0%(GC),250ppm MEHQ做穩(wěn)定劑單硬脂甘油酯 >60.0%(GC)1,2-乙二硫(>98.5%,BR)
β防御2(β-BD-2)ELISA試劑盒甲基異丁(MIBC) 99%單硬脂甘油酯 99%(GC)1,3,5-三溴(>98%,BR)
β防御104(DEFB104A)ELISA試劑盒乙酰乙甲酯 CP,98%L-半胱氨 ≥98%,非動(dòng)物源,用于培養(yǎng)1,3-二羥基萘(>98%,BR)
β防御1(DEFB1)ELISA試劑盒甲基異丁酮 >99.5%(GC)安息香 99.5%1,3-二甲氧基(>98%,BR)
β防御(β-Defensin)ELISA試劑盒壬基酚 GR聯(lián)甲酰 99.0%1,3-磺內(nèi)酯(>98%,BR)
β淀粉樣前體蛋白(β-APP)ELISA試劑盒壬基酚(混合物) SU安息香二甲 99%1,4-3,6-雙脫甘露(>98%,BR)
β淀粉樣多肽42(Aβ 42)ELISA試劑盒壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-羥環(huán)己基酮 98%1,4-環(huán)己二酮(>98%,BR)
β淀粉樣多肽42(ABeta 42)ELISA試劑盒對(duì)壬基酚 85%2-羥基-2-酮 97%1,4-二氨基蒽醌(>90%,BS)
β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)ELISA試劑盒對(duì)壬基酚 98%乙(95%) AR,95.0%1,4-二羥基蒽醌(>96%,BR)