詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013399 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
(Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長誘向因子1Multi-class antibodies: 48T
Synphilin-1 synphilin-1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit 人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子 96T
Nectin 4 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
BRN4 腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體 0.2ml
Synphilin-1 synphilin-1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/ RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-17 (mouse, rat) 白介-17抗體(小鼠,大鼠)Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lyn 膜相關(guān)蛋白酪激Lyn抗體 0.2ml
HDL(Human High density lipoprotein) ELISA Kit 人高密度脂蛋白 96T
RAB3A ras癌基因家族Rab3a抗體 0.1ml
phospho-Crk p38 (Tyr221) 磷化Crk p38抗體 0.1ml
IL-17 (mouse, rat) 白介-17抗體(小鼠,大鼠)Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
GCX1/C20orf100 20號染色體開放閱讀框100抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin A7 膜粘連蛋白7抗體 0.2ml
IL-32/NK4/FITC 熒光標(biāo)記白介32抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
RGS5 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
丁香假單胞桿菌丁香致病變種PCR試劑盒紅色紅曲霉種屬: Monascus│ruber提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 30-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
綠色木霉=木木霉種屬: Trichoderma│viride提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃
披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種種屬: Saccharopolyspora│hirsuta subsp. hirsuta分離基物: 甘蔗渣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain, Produces KA-5685 (aminoglycoside anti培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫乳桿菌種屬: Lactobacillus│algidus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0006生長條件: 20℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
血小板生成(TPO)ELISA試劑盒亞油甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99% (GC)丁二 AR,99.5%雷特格韋
血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒亞油甲酯 99%丁二 GCS,≥99.5% (T)雷特格韋
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒色標(biāo)Standard for GC ,≥99% (GC) 丁二 CP,99.0%雷帕霉/西羅莫司
血小板性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒3-巰基 99%,用于生化分析腐植 黃腐FA ≥90%雷帕霉/西羅莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)
血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒4-甲氧基乙烯 98%己二乙氨基乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲磺雷沙吉蘭
血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒乙甲酯 無級, 99.5%絨毛膜促性 ~5,000-7000 I.U. per mg白藜蘆
血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒甲甲酯 Standard for GC,>99%(GC)促性腺 來源于絕經(jīng)期婦女尿液 >200 I.U. per mg白藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)
血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒甲硫 99%肝鈉 185 USP units/mg 瑞替加濱
血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒3,4-(亞甲基二氧基) 98%4-叔丁基甲 99%瑞替加濱
血纖蛋白原γ鏈(FGG)ELISA試劑盒麥芽糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)基溴 99%利巴韋林
血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒DL-薄荷 99%環(huán)基溴 98%利巴韋林(標(biāo)準(zhǔn)品)
血纖蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒次甲基綠 80%對叔丁基甲甲酯 99%硫核糖霉
血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒乙二甲乙酯 for HPLC, ≥99%對氨基乙酮 99%利福布丁
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒3-甲基-1,3-丁二 90%4-羥基二甲酮 98%利福布丁(標(biāo)準(zhǔn)品)
血栓B2(TXB2)ELISA試劑盒十七甲酯 色標(biāo)GCS ,≥99.8% (GC)2-巰基-1-甲基咪唑 98%利福噴丁
血栓A2合成(TX-A2)ELISA試劑盒十七甲酯 98%環(huán)己鹽鹽 電子級利福噴丁(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。