詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腸道沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013551
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
L-enk/FITC 熒光標(biāo)記抗亮腦啡肽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKT2 蛋白激B2 0.1ml
Rabbit horse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Phospho-GSK3 alpha (Ser21) 磷化糖原合激3α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Phospho-HSP27 (Ser82)/FITC 熒光標(biāo)記磷化熱休克蛋白27抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
DRADA/ADAR1/FITC 熒光標(biāo)記雙鏈RNA腺苷脫氨基抗體(N端)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CXCL9/MIG γ干擾誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子抗體 0.1ml
Thymopentin 胸腺五肽 0.5mg
Prostate Specific Antigen 激肽釋放3/舒血管3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh WASF1/WAVE 1 WAVE1蛋白抗體 0.2ml
DRADA/ADAR1/FITC 熒光標(biāo)記雙鏈RNA腺苷脫氨基抗體(N端)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Donkey rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
Gcn1l1 廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARTS1 脂肪細(xì)胞源性亮氨基肽抗體(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)蛋白) 0.2ml
ICAD/FITC 熒光標(biāo)記Caspase 激活的脫氧核糖核抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM whole serum 兔抗猴IgM抗血清 1ml
Phospho-PRAS40 (Thr246)/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腸道沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
惡臭假單胞菌種屬: Pseudomonas│putda分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維、植、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi F8 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Roseivivaxlentus種屬: Roseivivaxlentus分離基物: 海潮區(qū),韓國安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃
β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒對(duì)壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,異構(gòu)體混合物乙(95%) CP,95.0%對(duì)二甲氧基(>98%,BR)
β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒對(duì)壬基酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,純品乙(95%) for HPLC1,5-二氨基萘(>98%,BR)
β淀粉樣蛋白(Aβ)ELISA試劑盒正 AR,97%乙(95%) GR,95.0% 1,5-二羥基萘(>97%,BR)
β-促脂(β-LPH)ELISA試劑盒正 CP,95%乙(95%) ACS1,6-二羥基萘(>98%,BR)
β半乳糖苷(β-GAL)ELISA試劑盒正 Standard for GC,>99%(GC)95%藥用酒精 藥用級(jí)1,8-辛二(>98%,BR)
β半乳糖苷(βGAL)ELISA試劑盒乙正酯 AR,99.0% 95%乙 光譜純1-萘乙酮(>95%,BR)
β氨基己糖苷A(β-Hex A)ELISA試劑盒甲醋酯 99%高哌 98%1-溴金剛(>99%,BR)
β4整合(ITG β4/CD104)ELISA試劑盒乙二 99.4%2-基吡啶 98%烯基硫脲(>98%,BR)
β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)ELISA試劑盒正 CP,98.5% 乙基黃原 AR,95%1-溴3-(>97%,BR)
β2整合(ITG β2/CD11+CD18)ELISA試劑盒聚乙烯吡咯酮 平均分子量 8000, K16-18乙基黃原 98%溴代庚(>98%,BR)
β2微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒三乙烯 CP,98.5%2-氨基嘧啶 98%1-溴代萘(>98%,BR)
β2微球蛋白(MGβ2)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 CP2-(3-氧基) 98%溴辛(>98%,BR)
β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 AR,97%1-甲酰 99%1-甲基咪唑(>98%,BR)
β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 Standard for GC, ≥99.5% (GC)3-吡啶甲 98%1-乙基咪唑(>98%,BR)
β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 >98.5%(GC)反-玉米 98%1-萘乙(>98%,BR)
β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒1,2,3,4-四氫萘 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)偏釩銨 CP,98%乙-1-萘酯(>98%,BR)