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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：托拉斯假單胞菌PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013400
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
ProGRP(Human pro-gastrin-releasing peptide) ELISA Kit 人胃泌釋放肽前體Multi-class antibodies： 48T
Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MARCH3 膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆/吡哆醇B6磷 96T
RNF36 環(huán)指蛋白36抗體 0.2ml
SIRP Alpha 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體 0.2ml
Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人壞死因子βMulti-class antibodies： 48T
Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒緩激肽 96T
RAB38 G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB38抗體 0.2ml
phospho-CREB-1(Ser142) 磷化CREB-1抗體 0.1ml
Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit mouse IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
GNRHR2 促性腺釋放受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Annexin A8 膜粘連蛋白8抗體 0.1ml
IL-31RA/CRL3/FITC 熒光標(biāo)記白介31受體a抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
RGS2/FITC 熒光標(biāo)記G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
托拉斯假單胞菌PCR試劑盒哈氏弧菌種屬: Vibrio│harveyi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0223生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
宇佐美曲霉種屬: Aspergillus│usamii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
巴拿馬沙門氏菌種屬: Salmonella│panama提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1,9,12 l,v 1,5培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
桔灰青霉種屬: Penicillium│aurantiogriseum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: citrinin培養(yǎng)基: 0015生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
血栓A2(TX-A2)ELISA試劑盒十七甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品二乙酰一肟 AR唑
血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒N-甲基-N-基硅三氟乙酰 GC，≥98.5%二乙酰一肟 >98.0%(GC)（標(biāo)準(zhǔn)品）
血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒3-甲基環(huán)己 99%氫 AR,≥47.0%鹽金剛乙
血清/血清(ST)ELISA試劑盒2-甲基-3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈉 80%（劇品）地拉羅司,去鐵斯若
血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒（-）-薄荷 Standard for GC ,≥99.5% (GC)間溴氟 99%地拉羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)
血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒反式-4-甲氧基-3--2-酮 97%三氧化二銻 SP利
血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒桑色 Indicator三氧化二銻 99.99% metals basis利（標(biāo)準(zhǔn)品）
血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒山崳甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品銻粒 99.999% metals basis,beads,1-6 mm那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒山崳甲酯 85%銻粒 99.99% metals basis韋
血清白蛋白(HSA)ELISA試劑盒甘油單油酯 99%銻粒 99.9999% metals basis羅格
血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激2(SGK2)ELISA試劑盒無(wú)溴化鎂 anhydrous, powder, 99.995%高純 67:33 混合鹽熔劑 99.98%,33%焦鋰67％偏羅格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）
血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激2(GSK2)ELISA試劑盒無(wú)溴化鎂 98%高純 12:22 混合鹽熔劑 99.98%,35.3 %焦鋰64.7 %馬來(lái)羅格列酮
血凝(HA)ELISA試劑盒戊甲酯 99%銅粉 99.9% metals basis,200目馬來(lái)羅格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）
血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒戊甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.8% (GC)鋰 99%降鈣；醋鮭魚降鈣
血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒甘露 ≥99.9999% metals basis鋰 99.99% metals basis塞卡替尼
血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒甘露 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.9999%偏鋰 ≥99.99%塞克硝唑
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