參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:狂犬病病毒通用RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013452
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
GATA4 ELISA Kit muman 人GATA結(jié)合蛋白4 ELISA試劑盒Multi-class antibodies: 96T
STAT1 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成 96T
NDUFS3 線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白抗體 0.2ml
BCL2 interacting protein BCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
STAT1 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit 人干擾活化基因205Multi-class antibodies: 48T
PAX3 配對(duì)盒基因3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HOPX/LAGY 肺癌相關(guān)蛋白Y抗體 0.2ml
SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化 96T
PTHLH 甲狀旁腺相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CDC40 細(xì)胞分裂周期同源蛋白40抗體 0.2ml
PAX3 配對(duì)盒基因3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GABABR1 gamma基丁B型受體1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APOA4 載脂蛋白A4抗體 0.2ml
IL-10/FITC 熒光標(biāo)記白介10抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240) /FITC 熒光標(biāo)記磷化突觸后密度蛋白95抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
狂犬病病毒通用RT-PCR試劑盒嗜熱鏈球菌種屬: Streptococcus│thermophilus分離基物: 奶提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 乳品發(fā)酵培養(yǎng)基: 6生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
傷寒沙門氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi 42 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
威特弗拉里亞鞘氨醇盒菌種屬: Sphingopyxis│witflariensis分離基物: 樣/廢提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌種屬: Yersinia│enterocolitica提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分群(型) 21培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
內(nèi)皮型一氧化氮合(eNOS)ELISA試劑盒曙紅Y,溶 AR碳鈉,十 AR,99%右旋糖苷/葡聚糖D40
內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA試劑盒曙紅Y(溶) ACS氟 AR,40.0%葡聚糖D20/右旋糖苷
內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)ELISA試劑盒熒光 AR,90%二甲 GCS,≥99.9%(GC)(二甲異構(gòu)體+乙基)沙格列汀/沙克列汀鹽鹽
內(nèi)皮特異分子-1(ESM-1)ELISA試劑盒熒光 IND二甲 AR,99%(二甲異構(gòu)體+乙基表沒(méi)食子兒茶沒(méi)食子酯(EGCG95%)
內(nèi)皮糖蛋白(ENG/CD105)ELISA試劑盒熒光鈉 AR二甲 CP,98%(二甲異構(gòu)體+乙基)達(dá)沙替尼一合物
內(nèi)皮2(EDN2)ELISA試劑盒吉氏色 BS二甲 HPLC依西美坦
內(nèi)皮1受體(EDNRA)ELISA試劑盒鉻鉛 AR,98.0%二甲 ACS, 98.5% (isomers plus ethylbenzene)依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)皮1(ET-1)ELISA試劑盒甲基藍(lán) ARACS, 98.5+% (isomers plus ethylbenzene)氨基比林
內(nèi)皮(ET-1)ELISA試劑盒甲基紅 AR氧化銦 SP馬來(lái)那敏/撲爾敏
內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒甲基橙 IND氧化銦 99.99% metals basis, <100 nm (TEM)馬來(lái)那敏/撲爾敏(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)肽2(EM-2)ELISA試劑盒甲基橙 ACS reagent,85 %納米二氧化錫 99.9% metals basis,50-70nm血管緊張II
腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒甲基紅鈉鹽 IND4,4'-二氨基二砜 97%維生 D3 ((膽骨化)
內(nèi)(ET)ELISA試劑盒甲基紅鈉鹽 ACS reagent, 95 %4,4'-二氨基二砜 分析標(biāo)準(zhǔn)品帕唑帕尼鹽鹽
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒亞甲基藍(lán) Biological stain2-萘磺 98%噻托溴銨
腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒亞甲基藍(lán) 超純級(jí),Dye content, >90%(HPLC)3-吡啶磺 98%富馬福莫特羅 (二)
腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒間甲基紅 Indicator1-萘磺鈉 technical grade, 85%富馬福莫特羅(無(wú))
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。