特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白Multi-class antibodies: 48T
SP-A 肺表面活性蛋白A抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期D1 96T
NRSF/REST 神經(jīng)元抑制蛋白抗體 0.1ml
BRWD3 智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體 0.1ml
SP-A 肺表面活性蛋白A抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺M(fèi)ulti-class antibodies: 48T
LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 1ml
17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T
Protein C inhibitor 蛋白C抑制因子抗體 0.1ml
CD4 CD4抗體 0.1ml
LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
GCSH 甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMER ARMER抗體 0.2ml
IFNGR1/CD119/FITC 熒光標(biāo)記干擾-gamma受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
Plectin/FITC 熒光標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人皰疹病毒7型染料法熒光定量PCR試劑盒50次大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 9生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
巨大芽孢桿菌種屬: BacillusmegatheriumdeBary安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用,分解有機(jī),肥料。培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30℃
人副流感病毒種屬: 副粘病毒屬│1型分離基物: 病料提供形式: 凍存管安全等級(jí): 3模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 基礎(chǔ)研究培養(yǎng)基: EMEM+2%FBS生長(zhǎng)條件: 37oC,5%CO2""存儲(chǔ)條件: -70
根霉種屬: Rhizopus│sp.分離基物: 曲藥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 制甜酒;產(chǎn)葡萄糖苷培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒三乙基芐基化銨 98%4-溴吲哚 98%1,6-二果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR)
單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒芐基三乙基溴化銨 98%靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%1,6-二果糖三鈉鹽(98-101.0%,BR)
單核趨化蛋白2(MCP-2)ELISA試劑盒18-冠-6 99%3-吲哚乙 98%銨(>99%,BR)
單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒15-冠-5 97%3-吲哚丁 98%四甲基對(duì)二鹽鹽(>99%,BR)
單核趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒乙基三基化膦 95% 激動(dòng) 99%1,3,5-三羥基二合物(>98%,BR)
單氧化(MAO)ELISA試劑盒甲基三基溴化鏻 98%1-萘乙 96%碳無(wú)(>98%,BR)
帶3蛋白(Band3)ELISA試劑盒四甲基化銨 98%8-氨基喹啉 98%?;?>98.5%,JP )
大皰性類(lèi)天皰瘡抗體(BP)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%溶液1-芐基哌 97%草銨(98~101%,BR)
大內(nèi)皮(Big ET-1)ELISA試劑盒四丁基化銨 離子色譜級(jí), ≥99.0%2-喹啉 98%二(BC)
大內(nèi)皮(Big ET)ELISA試劑盒四丁基化銨 97%8-羥基喹啉 AR,99.0%乙二四乙銅二鈉鹽(>98%,BR)
大腸菌(colicin)ELISA試劑盒四乙基氫氧化銨 AR,25%溶液8-羥基喹啉-5-磺 合物 98%5'-單腺苷(>95%,BR)
大腸癌專(zhuān)一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒四乙基氫氧化銨 AR,25%甲溶液8-羥基喹啉銅 94%硫鋁十六(>98%,BR)
大腸癌專(zhuān)一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒三鹽鹽 98%5-硝基-2-酚 98%葡萄糖-6-脫氫,硫銨懸浮液
大腸癌專(zhuān)一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 ~25% in H2O (~0.8 M)8-羥基喹啉半硫鹽 98%蘋(píng)果脫氫(>12,000U/ml,BC)
存活抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 10% in H2O1,2-環(huán)己二 99%N-羥基丁二酰亞(>98%,BR)
脆性組氨三聯(lián)體(FHIT)ELISA試劑盒四丁基氫氧化銨溶液 ~25% in methanol (~0.8 M)4-溴乙 99%沒(méi)食子一物(標(biāo)準(zhǔn)品)