參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒7型探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013525
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
LAIR-2/CD306/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞相關(guān)球蛋白樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SP-A/FITC 熒光標(biāo)記肺表面活性蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP5 A激錨定蛋白5抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml
SP-A/FITC 熒光標(biāo)記肺表面活性蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人球蛋白j鏈Multi-class antibodies: 48T
RASGRF1 Ras特異性鳥核苷釋放因子1Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HA tag HA tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
HSP-90 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白90 96T
protein C light chain K依賴的蛋白C輕鏈抗體 0.2ml
BTNL9 嗜乳脂蛋白樣9抗體 0.2ml
RASGRF1 Ras特異性鳥核苷釋放因子1Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/FITC FITC標(biāo)記的驢抗人IgG 0.3ml
GCS1 β-葡萄糖苷1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMCX3 ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 0.2ml
IGC/FITC 熒光標(biāo)記兔抗非洲爪蟾IGC抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.1ml
PLAUR/uPAR/FITC 熒光標(biāo)記尿激型纖溶原激活因子受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人皰疹病毒7型探針法熒光定量PCR試劑盒50次霉味假單胞菌種屬: Pseudomonas│mucidolens提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熱脫氮地芽孢桿菌種屬: Geobacillus│thermodenitrificans分離基物: sugar beet juice from extraction installations提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 60℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
粘土壤桿菌種屬: Agrobacterium│viscosum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L(+)酒石。培養(yǎng)基: CM0384生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
動(dòng)膠菌樣申氏菌種屬: Shinella│zoogloeoides分離基物: 上流式厭氧污泥層反應(yīng)堆提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 848生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒4,4'-偶氮(4-基戊) 98%葛根 98%DL-乳(USP)
膽(Cholic acid)ELISA試劑盒 ≥98.0% (HPLC)(劇品)黃藤 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%硫氫鈉一(>98%,BC)
膽(CA)ELISA試劑盒 Standard for GC, ≥99.5% (GC)黃藤 97%檸檬三銨
膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)ELISA試劑盒2-乙酰氨基甲 99%(劇品)白藜蘆 分析標(biāo)準(zhǔn)品鉻天青S(Ind Grade)
膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)ELISA試劑盒1,2-并異噻唑啉-3-酮 98%白藜蘆 99%5'-三胞苷二鈉鹽
膽囊收縮(CCK)ELISA試劑盒3,5-二甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品白藜蘆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于食品分析化鋇二
轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)ELISA試劑盒3,5-二甲 98%蘿卜硫 90%纖維(活>45 U/mg)
乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)ELISA試劑盒正己 AR,99.0%雷甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%化十六基吡啶一(分子生物學(xué)級(jí))
乙?;?/span>(CHAc)ELISA試劑盒對羥基聯(lián) 99%對氨基乙酮 AR醋鉛三(>99%,BC)
甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒對羥基聯(lián) 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析對氨基乙酮 99%派洛寧Y(Ind Grade)
膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒2-氧基 99%金絲桃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96%對羥基甲鈉(>99%,BR)
膽固7α-羥化(CYP7A)ELISA試劑盒芐基基溴化銨 98%金絲桃 96%魚硫鹽來源于鮭魚
膽固(CH)ELISA試劑盒芐基基溴化銨 99%真空手套箱過濾器濾芯5-溴-4--3-吲哚基鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí))
單絲氨蛋白激1(LIMK1)ELISA試劑盒芐基基化銨 98%上門維修費(fèi)用乙銅合物(>99%,BR)
單核增多性李斯特菌O((LLO)ELISA試劑盒芐基基氫氧化銨 20%甲溶液真空手套箱用手套 丁基合成橡膠肌鈉鹽四
單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒芐基基氫氧化銨 25%溶液(溴甲基)環(huán) 97%3,3'-二氨基聯(lián)四鹽二(>99%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。