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漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 13:52:05瀏覽次數(shù):215

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013553 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:104-46-1標(biāo)準(zhǔn)品全組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒
黃CAS:69-89-6冰凍切片組織衰老晚期特異性脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位染色試劑盒
綠僵菌石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素堿性品紅(ZIEHL-NEELSEN)原位間接染色試劑盒
荷斯坦奶牛胎兒成纖維細(xì)胞;

詳細(xì)介紹

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱:漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次

產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013553

產(chǎn)品規(guī)格:50次

產(chǎn)品分類:純化試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
9.jpg

 

實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

 

注意事項(xiàng)

1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 人纖維介蛋白Multi-class antibodies: 48T

 Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  Mouse IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM  0.1ml

AFP-L3(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3) ELISA Kit 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3 96T

NECAB1 神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體 0.2ml

Phospho-Btk (Ser180) 磷化蛋白酪激ATK抗體 0.1ml

 Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml

 tox IgM(Human  toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體Multi-class antibodies: 48T

 PPAR-delta/beta D型-過氧化活化增生受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Heparanase 乙酰肝抗體  0.1ml

EL ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪 96T

Prostaglandin I2 Receptor 前列環(huán)受體抗體 0.2ml

phospho-Casein kinase I isoforms gamma 1+2+3 ( Tyr263) 磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體 0.1ml

 PPAR-delta/beta D型-過氧化活化增生受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Donkey  rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

phospho-GIRK1 (Ser185) 磷化G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ASAH2 ?;拾贝济擋?抗體  0.2ml

 IASPP/FITC 熒光標(biāo)IASPP蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Monkey IgM/Bio 生物標(biāo)記的兔抗猴IgM  0.3ml

 phospho-Akt(Thr450) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化蛋白激B抗體(蘇磷化位點(diǎn):450)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次哈氏弧菌種屬: Vibrioharveyi分離基物: 海安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 102生長(zhǎng)條件: 30℃

雙歧雙歧桿菌種屬: Bifidobacteriumbifidum(Tissier)Orla-Jensen安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 乳制品發(fā)酵;食品飲料培養(yǎng)基: 62生長(zhǎng)條件: 37℃

痤瘡丙桿菌種屬: Propionibacteriumacnes(Gilchrist)DouglasandGunterdepositedasCorynebacteriumacnes安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 多糖劑、厭氧鑒定控制菌株、API質(zhì)量控制菌株培養(yǎng)基: 55生長(zhǎng)條件: 37℃

橢圓釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 啤酒酵母培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法

α干擾(IFN-α)ELISA試劑盒D-2-甘氨 99%4-Boc-氨基 98%2-(>99%,BR)

α輔肌動(dòng)蛋白4(ACTN-4)ELISA試劑盒L?(+)-α-甘氨 98%鉻吡啶 98%5-硝基-2-甲(>98%,BR)

α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒3,5-二甲基-4-吡唑 97%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯  98% 2-乙酰(>98.5%,BR)

α輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒4-羥基-3-甲 98%對(duì)四聯(lián) 98%2-(>98%,BR)

α輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 96%紅熒烯 99%2-乙基磺鈉(>98%,BR)

α防御4(NP-4)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 99%(R)-3-氨基-1-BOC- 98%2'-脫氧肌酐-5'-鈉(>98%,BR)

α淀粉(AMY1)ELISA試劑盒吡唑 99%(R)-(-)-3- 氨基吡咯 98%鄰乙氧基甲(>98%,BR)

α淀粉(AMS/AMY)ELISA試劑盒亞硫鈣 90%R-1-芐氧羰基-羥基吡咯 95%鄰乙氧基甲(>98%,BR)

α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒四乙基米氏酮 99%三氧化硫-吡啶復(fù)合物 97%2-乙基丁(>99%,BR)

α半乳糖基(α-Gal)ELISA試劑盒米氏酮 98%(S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基 98%鄰羥基乙酮(>99%,BR)

α半乳糖苷(αGAL)ELISA試劑盒N-甲基二乙 98%(S)-3-羥基吡咯鹽鹽 97%2-羥基(>98%,BR)

αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA試劑盒N-甲基二乙 99%(S)-3-氨基吡咯 98%2-異基咪唑(>98%,BR)

αL巖藻糖苷(AFU)ELISA試劑盒2-(甲氨基)乙 99%S-1-芐氧羰基-3-羧基吡咯 97%2-萘乙(植物級(jí))

αL艾杜糖苷(IDUA)ELISA試劑盒2,2'-硫代雙乙 99%三(4-) 98%2-萘甲(>98%,BR)

α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒 CP,97.0% (劇品)8-羥基喹啉鋁 98%乙-2-萘酯(>98%,BR)

α2抗纖溶(α2-AP)ELISA試劑盒 AR,99.0%(劇品)2,6-二氟 98%2-基-beta-D-木糖苷(>98%,BR)

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

 


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