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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：霍山石斛PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013555
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Lectin/FITC 熒光標(biāo)記抗凝集抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Snail/FITC 熒光標(biāo)記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALAD δ氨基乙酰丙脫抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
GSK-3 Beta (CT) 糖原合激-3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Snail/FITC 熒光標(biāo)記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯CMulti-class antibodies： 48T
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷化泛連接NEDD4-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL5RA/CD125 白介-5受體α鏈抗體IL-5Rα 0.1ml
PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
Prostaglandin dehydrogenase 1 前列腺脫氫1抗體 0.1ml
C5b-9 末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 0.2ml
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷化泛連接NEDD4-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GJA10 間隙連接蛋白10抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ASAP1/DDEF1 發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體 0.1ml
IAA/FITC 熒光標(biāo)記吲哚-3-乙抗體/植物生長抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.3ml
PKB/AKT-1 /FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
霍山石斛PCR試劑盒50次大腸埃希氏菌(大腸桿菌)種屬: Escherichiacoli安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致瀉大腸埃希氏菌（EPEC）。血清型：O127：K63培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereu提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)谷氨培養(yǎng)基: 0108生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
煙曲霉種屬: AspergillusfumigatusFresenius安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 15生長條件: 25-28℃
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 啤酒培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒基氫鈉 5.0 M in 1 M NaOH1,2-二溴 99%3-(>98%,BR)
T特異性鳥苷三(Tgtp)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 AR2-溴異丁乙酯 98%叔丁基-4-羥基甲(>98%,BR)
T受體(TCR)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 99.99% metals basis氧氟沙星 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (HPLC)4,4'-聯(lián)吡啶(>98%,BR)
T急性母白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒硫鎂，七 AR,99.0%氧氟沙星 98%4,4-二羥基二砜(>98%,BR)
T活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒硫鎂，七 GR,99.5%氫 CP，99%4,5-二熒光(>98%,BR)
T表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA試劑盒無硫鎂 CPL- 99%4-溴異喹啉(>98%,BR)
TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒莫能霉鈉 97%L- ACS, ≥99.5%對溴氧乙(>95%,Ind Grade)
Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)ELISA試劑盒甲丁酯 98%L- FCC, ≥99.7%, FG對基甲(>98%,BR)
Traf2結(jié)合蛋白(T2BP)ELISA試劑盒甲芐酯 96%L- 藥用級對乙氧基甲(>98%,BR)
Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA試劑盒4-異酯 98%唑靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-羥基(>98%,BR)
Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒環(huán)己基異酯 98%唑靈 95%4-甲(>98%,BR)
Toll樣受體7(TLR7)ELISA試劑盒綠麥隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品5-氮胞苷 98%對甲(>98.5%,BR)
Toll樣受體6(TLR6)ELISA試劑盒綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%2’-脫氧鳥苷 99%對甲氧基乙酮(>98%,BR)
Toll樣受體5(TLR5)ELISA試劑盒綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6% 5-氟脫氧胞苷 98%4-甲氧基酚(>98%,BR)
Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒3,4-二異酯 97%維生A棕櫚酯 170 USP units /g對甲基肉桂(>98%,BR)
Toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 97%DL-α-酚 96%4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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