注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013469
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
LDH/FITC 熒光標(biāo)記抗乳脫氫抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SSEA4/FITC 熒光標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-4IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aggrecanase-2/ADAMTS-5 軟骨蛋白聚糖抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Glycophorin A 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/Bio 生物標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSEA4/FITC 熒光標(biāo)記階段特異性胚胎表面抗原-4IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
AAV(Human adeno-associated virus) ELISA Kit 人腺相關(guān)病毒Multi-class antibodies: 48T
phospho-IRS1(Ser789) 磷化胰島受體底物-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Leptin 瘦抗體 0.1ml
E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三醇 96T
PSMD7 蛋白調(diào)解因子7抗體 0.2ml
CLSTN2 老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體 0.2ml
phospho-IRS1(Ser789) 磷化胰島受體底物-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
GRM4 促代謝型谷受體4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOJ/Clusterin 載脂蛋白J抗體 0.1ml
phospho-IKK beta (Tyr188) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
PROK1/EG-VEGF/FITC 熒光標(biāo)記腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
卡氏肺孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒50次鮑氏志賀氏菌種屬: Shigella│boydii提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: C 12培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus分離基物: 牛奶提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
球形芽孢桿菌種屬: Bacillus│sphaericus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 殺蚊蟲高毒菌株培養(yǎng)基: 266生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
顆粒H(GZMH/CGL2/CTSGL2)ELISA試劑盒無碳鈉 AR4-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲 97%蘇丹/溶劑黑3
顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒丁二鈉 AR,99.0%硫代乙乙酯 98%B
顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒亞硝基鐵化鈉 99.98% metals basis3-氟-4-酚 99%7B/溶劑紅19/脂肪紅7B
人抗組織轉(zhuǎn)谷氨??贵wIgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒亞三酯 CP,97%對氟甲乙酯 99%蘇丹藍(lán)II/溶劑藍(lán)35
人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒亞三酯 98%3-氟芐 97%吖啶橙/性橙14
人抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒四氫糠 AR,98.0%8-氟-4-羥基-2-三氟甲基喹啉 97%甲基紅
人抗滋養(yǎng)膜抗體(ATA)ELISA試劑盒四氫糠 CP對氟甲甲酯 97%間甲基紅
人抗中性粒顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒四氫糠 99%6-羥基-2-吡啶羧 97%甲基紅鈉鹽/性紅2
人抗中性??贵w(ANA)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 ARN-(2-)哌 98%西諾沙星;新惡
人抗中性粒核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒甲二異酯 98%(劇品)2-羥基 97%19-去甲-4-雄烯二酮
人抗中性粒胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒甲二異酯 Standard for GC(劇品)2-羥基 99%達(dá)格列凈一 ;達(dá)格列合物
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒硫酚 99%(劇品)2-基酚 95%安塞曲匹/膽固脂轉(zhuǎn)移蛋白阻滯劑
人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 離子對色譜級,≥99.0% (AT)(R)-(-)-5-羥甲基-2-酮 99%達(dá)比加群酯
人抗著絲點抗體(ACA)ELISA試劑盒四甲基溴化銨 ACS, ≥98.0%(S)-(+)-5-羥甲基-2-吡 98%利伐沙班
人抗增殖核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒乙 99%,含銅屑穩(wěn)定劑(S)-1-Boc-3-羥基吡咯 98%利伐沙班(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒三 AR,99.5%2-羥基-4-三氟甲基嘧啶 97%阿哌沙班