參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):耶氏肺孢子蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013470
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 人S100B蛋白Multi-class antibodies: 48T
SSEA4 階段特異性胚胎表面抗原-4Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
Smad1(Human Mothers against decapentaplegic homolog 1) ELISA Kit 人Smad1 96T
NXPH1 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白1抗體 0.2ml
beta Defensin 1 防御β1/Defensin β1抗體 0.1ml
SSEA4 階段特異性胚胎表面抗原-4Multi-class antibodies: 0.2ml
Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgGMulti-class antibodies: 48T
KCNA7 鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Layilin 透明質(zhì)受體抗體 0.1ml
SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人生長(zhǎng)抑 96T
PSMD6 蛋白調(diào)解因子6抗體 0.2ml
CASKIN2 皮膚相互作用蛋白2抗體 0.1ml
KCNA7 鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
GST tag GST標(biāo)簽蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOL3 載脂蛋白L3抗體 0.2ml
phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.1ml
Profilin 2/FITC 熒光標(biāo)記前纖維蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
耶氏肺孢子蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒50次鼠李糖乳桿菌種屬: Lactobacillus│rhamnosus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 分類(lèi)學(xué)研究。用于葉輔研究、胞外核研究、乳脫氫性能測(cè)定、葉實(shí)驗(yàn)、尼克實(shí)驗(yàn)、泛實(shí)驗(yàn)和核黃實(shí)驗(yàn)等研究;用于益生菌類(lèi)保健食品。培養(yǎng)基: CM0793生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
黑曲霉種屬: Aspergillus niger van Tieghem提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 淀粉原料發(fā)酵檸檬培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長(zhǎng)條件: 25-28℃,好氧
魯氏接合酵母種屬: Zygosaccharomyces│rouxii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造醬油培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
佛羅里達(dá)無(wú)孢子側(cè)耳種屬: Pleurotusflorida-sporelessChang.安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 24-26℃
人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒1- 99%4-(1-)吡啶 98%哌立福新(KRX-0401)
人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒殼聚糖 脫乙酰度≥95%, ,粘度100-200 mpa.s4(5)-羥甲基咪唑鹽鹽 98%鹽阿那格雷
人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)ELISA試劑盒羧化殼聚糖 BR,溶性(R)-3-羥基吡咯鹽鹽 98%甲磺沙奎拉韋
人抗胰島受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒殼聚糖 低粘度:<200 mPa.s4-甲甲酯 98%三合鹽鹽
人抗胰蛋白(AT)ELISA試劑盒殼聚糖 中粘度200-400 mPa.s2-甲甲酯 98%三合鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒殼聚糖 高粘度>400 mPa.s3--4-氨 95%抑氨肽,烏美司,貝他定,丁抑制
人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒D(+)-氨基葡萄糖鹽鹽 ≥99%吲哚-2-羧 98%抑氨肽(進(jìn)口)
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒D(+)-氨基葡萄糖鹽鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品吲哚-3-羧 98%高藜蘆/3,4-二甲氧基
人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)ELISA試劑盒亞砜 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)1-甲基環(huán)戊 99%高藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)ELISA試劑盒維生K3 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-甲基-3-吲哚 97%PD0325901
人抗血小板抗體(anti-PA Ab)ELISA試劑盒甲萘醌 98%5-甲基異噁唑-4-甲 98%西他塞坦鈉/司他生坦鈉
人抗胸腺球蛋白(ATG)ELISA試劑盒1000℃節(jié)能箱式電爐 SX-G071033,3-二甲基烯甲酯 98%西他塞坦鈉/司他生坦鈉
人抗信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒三正丁基氧化膦 95%3-甲基-4-甲 99%西他塞坦鈉/司他生坦鈉
人抗心脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒黃芩苷 90%3-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲 97%輪環(huán)藤寧四乙/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二-1,4,7,10-四乙
人抗心脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒肌 99%4-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲 97%拉米夫定
人抗心脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒硫代硫銨 60%溶液6-甲基吲哚 98%拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。