詳細(xì)介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013556 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
|
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
Human Elastin,ELN ELISA Kit 人彈性蛋白Multi-class antibodies: 48T
Snail Snail蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
PAP(Mouse Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 小鼠前列腺性磷 96T
Neurabin 1 神經(jīng)組織特異性F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
proBNP 腦納前體抗體 0.1ml
Snail Snail蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit 人P物質(zhì)受體Multi-class antibodies: 48T
MMP-8 基質(zhì)金屬蛋白-8抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IQCC IQCC蛋白抗體 0.2ml
VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1 96T
ProSAPiP1 含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體 0.2ml
CMKLR1 趨化樣因子受體1抗體 0.1ml
MMP-8 基質(zhì)金屬蛋白-8抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GJA3 間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASAP3 GTP激活蛋白ASAP3抗體 0.2ml
COX10/FITC 熒光標(biāo)記COX10抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.5ml
PKB/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
雙歧桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒繩狀青霉(斜面)種屬: Penicillium funiculosum提供形式: 斜面安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于葡聚糖。培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀 3g,硫鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件: 25℃,好氧
亞北極新鞘氨醇菌種屬: Novosphingobium│subarcticum提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
金黃色葡萄球菌種屬: Staphyloccocus│aureus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 0002生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
青霉種屬: Penicillium│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒二甲氨酰 97%DL-α-酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-甲(>98%,BR)
Toll樣受體1(TLR1)ELISA試劑盒N,N-二乙基甲酰 98%基氫醌 98%對(duì)硝基芐(>98%,BR)
TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 AR,99.0%(劇品)D-α-酚醋酯 96%4-硝基溴化芐(>98%,BC)
TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒芴甲氧羰酰 98%L-賴氨甲酯鹽鹽 98%4-硝基芐(>98%,BR)
Tau蛋白(TAU)ELISA試劑盒伏草隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品甲 AR,99%基-2-乙酰氨基-2-脫氧-b-D-葡萄糖苷(>99%,BC)
Tau-231蛋白(TAU-231)ELISA試劑盒甲異酯 97%草二甲酯 CP,98%4--Α-L-吡喃海藻糖苷(>98%,BC)
Tau-181蛋白(TAU-181)ELISA試劑盒異隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%馬來二乙酯 96%4-基-beta-D-葡萄糖苷(>98%,BC)
TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)ELISA試劑盒利谷隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品1,4-二甲氧基 99%4-肼(>98%,BC)
s腺苷同型半胱氨(SAH)ELISA試劑盒 98%(劇品)1,4-二甲氧基 ≥99%,FCC酮(>98%,BR)
Syndecan-3/(SDC3)ELISA試劑盒綠谷隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品間二甲 98%無型核染色劑
Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒甲正酯 99%馬來二甲酯 98%5,5-二甲基-1,3-環(huán)己二酮
STEAP家族成員4(Steap4)ELISA試劑盒甲酯 98%乙酯 AR,99% 5-氟胞苷(>98%,BR)
STEAP家族成員1(Steap1)ELISA試劑盒甲基托布津 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 CP駢三氮唑(>98%,BR)
Stathmin 1(STMN1)ELISA試劑盒正 ACS, ≥99.5%乙 GR,99%5-甲基吲哚(>98%,BR)
STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒2,4-二 99%甲氧基乙甲酯 99%5-硝基愈創(chuàng)木酚(植物級(jí))
SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2(SMOC2)ELISA試劑盒(S)-4-芐基-2-惡唑酮 99%1-萘甲 98%6-溴-2-萘酚(>98%,BR)