注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬皰疹病毒 I 型(偽狂犬病病毒)PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013561
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 人B細(xì)胞連接蛋白Multi-class antibodies: 48T
SMN1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
GP-BB ELISA Kit 大鼠糖原磷化同工BB 96T
Neuron navigator 1 神經(jīng)細(xì)胞領(lǐng)蛋白Nav1抗體 0.2ml
phospho-BAD (Ser128) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 0.1ml
SMN1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突觸核蛋白Multi-class antibodies: 48T
Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIFPH4 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化抗體 0.2ml
CsA(Mouse Cyclosporine A) ELISA Kit 小鼠環(huán)孢A 96T
Properdin P因子/備解抗體 0.1ml
CD161 CD161抗體 0.1ml
Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLB1 β-半乳糖苷1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB17 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體 0.2ml
HSTF2/HSF2 /FITC 熒光標(biāo)記熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.3ml
phospho-PKC delta (Tyr52)/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
豬皰疹病毒 I 型(偽狂犬病病毒)PCR試劑盒50次藤黃微球菌種屬: Micrococcus│luteus分離基物: 不詳提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,指示菌株培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
少動(dòng)鞘氨醇單胞菌種屬: Sphingomonas paucimobilis分離基物: 石油污染土,大慶油田提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。121℃,15min。生長條件: 30℃,24h,好氧,鏡檢為陰性桿菌,純
銅綠假單胞菌種屬: Pseudomonas│aeruginosa提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測芯片培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
抑云玫瑰變色菌種屬: Roseovarius│nubinhibens分離基物: 樣/表層海提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
N端前腦鈉(NT-proBNP)ELISA試劑盒萘-D8 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 95%丁二銨(>98%,BR)
NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒雄酮 99%乙 95%硫代硫銨
NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒去氫表雄酮 99%乙 ≥90%, FCC, Kosher, FG鹽氨啉(>99%,BP)
NADPH氧化3(NOX3/MOX2)ELISA試劑盒2,3,5-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙 50%溶液3-[N-(1,1-二甲基-2-)]氨基-2-羥磺鈉鹽(>98%,BP)
NADPH氧化1(NOX1/MOX1/NOH1)ELISA試劑盒2,3,6-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高 AR,99.5%對甲氧基甲(>97%,BR)
Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒2,3,4-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高鈉,無 ACS, ≥98.0%三氧化二銻(>98%,BR)
N(ε)羧乙基賴氨(CEL)ELISA試劑盒3,4,5-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品高鈉,無 99.99% metals basis(>99%,BR)
MYC誘導(dǎo)核抗原(MINA)ELISA試劑盒蓖麻油 CP高鈉,無 for HPLC,99.0% 過硫銨
MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒萎銹靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%高鈉,一 ACS, 98%甲亞鹽(>95%,BR)
MAP雙特異性1(DUSP-1)ELISA試劑盒解喹 分析標(biāo)準(zhǔn)品鈉 CP, ≥98.0%天青C(>50%,BS)
M2腎酮激(M2-PK)ELISA試劑盒炔草 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-O-甲基-D-吡喃葡萄糖 99%鋇一(>99%,BR)
L選擇(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒5--8-羥基喹啉 97%過硫氫 ≥47% KHSO5 basis硫鋇(>98%,BR)
L-乳脫氫(L-LDH)ELISA試劑盒2,3-二氟-5-吡啶 98%二甲氨酰 97%硫化鋇(>98%,BR)
L-氨解氨(PAL)ELISA試劑盒唑螨酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%3-硝基-4-氨基酚 98%磺(>98%,BR)
L氨解氨(PAL)ELISA試劑盒2-庚 98%4-硝基鄰二 97%安息香(>98%,BR)
L-氨基氧化(LAO)ELISA試劑盒2-庚 ≥97%,Kosher納米三氧化二鐵(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型安息香乙(>98%,BR)