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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013479
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯Multi-class antibodies： 48T
srGAP3 精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián) 96T
NKR2B4 CD244自然殺傷細(xì)胞受體2B4抗體 0.1ml
Bax Bax 0.1ml
srGAP3 精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit 人甲胺喋呤Multi-class antibodies： 48T
PFK2/PFKFB3 6磷果糖激2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (tri methyl K36) 基化組蛋白H3抗體 0.1ml
sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T
PSMA4 蛋白體PSMα4/20S Proteasome α4抗體 0.2ml
COMMD8 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 0.2ml
PFK2/PFKFB3 6磷果糖激2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
GLUT12 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APP695 (CT) 淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端) 0.1ml
phospho-IKK gamma (Ser376)/FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
pre-X protein(NT)/FITC 熒光標(biāo)記抗乙肝病毒pre-X蛋白抗體(N端)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒50次嗜蟲沙雷氏菌種屬: Serratia│entomophila分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維、植、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
天門冬紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│asporaginoviolaceus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
新不倫瑞克沙門氏菌種屬: Salmonella│new-brunswick提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 3,15 l,v 1,7培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒亞甲基藍(lán) 超純級,Dye content, >90%(HPLC)納米氮化鋁 99.9% metals basis,50nm重去甲腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒孔雀石綠 AR氮化鋁 N >33.0%， D50/2.0 μm6-氨基己
人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅰ 高純級,90%氮化鋁 N >32.5 % ，D97/5.0 μm普魯蘭糖;普魯蘭多糖
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅰ AR納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%維生 E, 酚
人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒鎂試劑Ⅱ AR納米鋇鐵氧體 200nm,99%司他夫定
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒甲基紫 AR納米鉍粉 99.9% metals basis,40nm,球形司他夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)三氧化二鉻 60nm 球形，98.0%嗎貝
人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒1-亞硝基-2-萘酚 96%納米鐵鈷 40nm 球形 99.5%嗎貝(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA試劑盒橙黃G BS納米碳粉 99.5%，30nm黃芪甲苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒橙黃G AR，≥80.0% (HPLC)四氧化三鈷 30nm 球形，99.5%黃芪甲苷
人抗肝膜抗體(LMA)ELISA試劑盒橙黃G AR，≥80.0% (HPLC)氧化鏑 40nm 球形，99.5%那格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）
人抗肝胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒橙黃G ≥96%(HPLC)石墨 99%，40nm那格列奈
人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒油紅O Biological stain納米羥基灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%那格列奈
人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA試劑盒橙黃Ⅳ Indicator納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形丁溴東莨菪
人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒橙黃Ⅰ Biological stain鎂 99.5%，50nm,灰色單寧,鞣,丹寧
人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒橙黃Ⅰ Indicator氧化釹 40nm 球形，99.5%馬拉韋若
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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