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增強型黃色熒光蛋白（EYFP）簡介
在綠色熒光蛋白的晶體結(jié)構(gòu)研究中發(fā)現(xiàn)203位接近生色團后，對黃色熒光蛋白家族的研究才開始。將203位突變可以穩(wěn)定生色團在激發(fā)狀態(tài)的偶極矩，這樣可以使激發(fā)光和發(fā)射光的波長均增加20nm。并改造成增強黃色熒光蛋白（EYFP）。EYFP的亮度和發(fā)射光譜的有機結(jié)合使得這一熒光探針在熒光多色成像中得到很好的應(yīng)用。EYFP還可以與增強青色熒光蛋白（ECFP）或GFP2一起應(yīng)用到FRET中。然而，黃色熒光蛋白也存在對酸性條件非常敏感，pH6.5時會失去近50%的熒光。EYFP對氯離子非常敏感，光漂白現(xiàn)象比綠色熒光蛋白還嚴(yán)重。
EYFP的產(chǎn)生主要依賴于對野生型GFP的發(fā)色團周圍微環(huán)境的改造。相對于avGFP，最大的突變在于取代了Thr203。當(dāng)熒光蛋白折疊時，Tyr203的酚基將會伸入到熒光蛋白內(nèi)部的空腔，并且與發(fā)色團的酚基團在空間上形成了π-π疊加相互作用。這種突變穩(wěn)定了發(fā)色團的激發(fā)態(tài)偶極矩，從而使得GFP的吸收光譜和發(fā)射光譜整體向長波方向平移約20 nm左右。另外Gln69向Lys的突變增強了發(fā)色基的離子化，將發(fā)射波長向長波方向進一步移動了1-2 nm。
【相關(guān)產(chǎn)品】
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YPet黃色熒光蛋白
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mBanana橙色熒光蛋白
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以上資料來自小編MSQ,2023.09.27
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