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  • 干貨 | Ct值過大怎么辦?

    在合理區(qū)間內(nèi),Ct值小,感覺美滋滋,但Ct值大的時候,可能就難受了≧﹏≦今天小翌就給大家分享一下如何應(yīng)對Ct值偏大的問題~Ct值,即循環(huán)閾值(CycleThreshold),是指熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中熒光信號超過背景噪音水平時的循環(huán)次數(shù),是最重要的關(guān)鍵參數(shù),可用于分析基因表達(dá)差異、計(jì)算基因拷貝數(shù)或者實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制等等。從圖表上我們可以看到的是熒光閾值和擴(kuò)增曲線交點(diǎn)的橫坐標(biāo)即為Ct值。其中出現(xiàn)的熒光閾值一般是基線的標(biāo)準(zhǔn)差的10倍,在實(shí)際操作中也可以手動調(diào)節(jié)。而Ct值與模板量、產(chǎn)物量之間的關(guān)系為:擴(kuò)增產(chǎn)
  • 探索體外巨噬細(xì)胞極化培養(yǎng):細(xì)胞因子的力量

    探索體外巨噬細(xì)胞極化培養(yǎng):細(xì)胞因子的力量01前言巨噬細(xì)胞(Macrophage)是從血液中的單核細(xì)胞分化而來的一種大型吞噬細(xì)胞。它們存在于幾乎所有組織中,特別是在那些與外界接觸頻繁的組織如皮膚、肺和腸道,在人體的免疫防御、炎癥反應(yīng)、組織修復(fù)、免疫調(diào)節(jié)以及疾病發(fā)展等多個生物學(xué)過程中,巨噬細(xì)胞都扮演著至關(guān)重要的角色。原代人類巨噬細(xì)胞很難從組織中分離出足夠數(shù)量的巨噬細(xì)胞,并且在培養(yǎng)中不增殖。單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞提供了一種的替代品,因?yàn)槿搜褐械膯魏思?xì)胞很容易大量獲得,并且可以在體外分化為巨噬細(xì)胞。0
  • 樹突狀細(xì)胞制備的實(shí)驗(yàn)方案及細(xì)胞因子的作用

    1什么是樹突狀細(xì)胞(DC)?DC細(xì)胞是“DendriticCell”,中文名稱是樹突狀細(xì)胞。樹突狀細(xì)胞是人體內(nèi)有效的抗原遞呈細(xì)胞(antigenpresentingcell,APC)。DC細(xì)胞是能夠顯著刺激初始T細(xì)胞增值的APC,其他種類的APC(如單核巨噬細(xì)胞,B細(xì)胞等)僅能刺激已活化的或者記憶性的T細(xì)胞,因此DC細(xì)胞是適應(yīng)性T細(xì)胞免疫應(yīng)答的始動者,在腫瘤免疫中發(fā)揮著及其重要的作用。DC表面高表達(dá)MHC-I和MHC-II類分子,具有特異性表面標(biāo)志的細(xì)胞。其對抗原攝取,加工以及刺激T細(xì)胞使其激活
  • PBCV DNA Ligase:連接性能遠(yuǎn)超T4 連接酶,適用于原位測序、高靈敏RNA 檢測

    PBCVDNALigase,亦稱為SplintR連接酶、PBCV-1DNALigase或Chorella病毒DNA連接酶,是一種ATP依賴的DNA連接酶,能夠高效催化與一條互補(bǔ)的RNA單鏈配對的兩條相鄰DNA單鏈的連接反應(yīng)。這兩條相鄰的DNA鏈中,提供3'羥基的被稱之為受體DNA鏈(AcceptorDNA),提供5'磷酸的被稱之為供體DNA鏈(DonorDNA),在這個連接過程中需要一條互補(bǔ)的RNA鏈對兩條DNA單鏈起“夾板”或“支架”的作用(圖1)。圖1.PBCVDNALigase反應(yīng)原理示意
  • 卵巢癌類器官構(gòu)建實(shí)用寶典

    每年的5月8號是“世界卵巢癌日”,根據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)發(fā)布的2020年全球癌癥發(fā)病數(shù)據(jù)報告顯示:2020年中國新發(fā)癌癥病例457萬例,其中男性248萬例,女性209萬例,2020年中國癌癥死亡病例為300萬例,其中男性182萬例,女性118萬例,在婦科三大腫瘤中卵巢癌的死亡率。圖.2020年中國女性癌癥新發(fā)病例數(shù)類型卵巢癌類器官(organoids)是指利用卵巢瘤細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。卵巢癌類器官可以作為疾病模型,相較于傳統(tǒng)2D
  • NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路-細(xì)數(shù)那些經(jīng)典靶點(diǎn)抗體

    NF-κB是一種蛋白復(fù)合物,是細(xì)胞內(nèi)重要的核轉(zhuǎn)錄因子。根據(jù)目前研發(fā)發(fā)現(xiàn),NF-κB幾乎存在于所有動物細(xì)胞中,并參與細(xì)胞對壓力、細(xì)胞因子、自由基、紫外線和抗原等刺激的反應(yīng);在炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮核心作用,還參與與突觸可塑性和記憶相關(guān)的過程。NF-κB在維持機(jī)體的正常生理功能中起著非常重要的作用。NF-κB信號通路與機(jī)體的自身免疫有關(guān),脊椎動物的炎癥反應(yīng)就是自身免疫的重要表現(xiàn)形式之一。此外,NF-κB也可以保護(hù)機(jī)體免受其他傷害,比如有毒的化學(xué)物質(zhì)和射線等,在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞
  • 解決方案 | 生殖遺傳NGS檢測產(chǎn)品助力出生缺陷防控

    2024年1月開始,生殖遺傳領(lǐng)域逐步迎來一系列里程碑事件,四篇攜帶者篩查領(lǐng)域方向的專家共識齊發(fā),共同支持?jǐn)y篩的臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化。多家檢測公司的遺傳NGS檢測試劑盒相繼獲批上市,生殖遺傳檢測加速邁進(jìn)“證”時代,大大拓展了NGS技術(shù)應(yīng)用于產(chǎn)前診斷的范圍,更標(biāo)志著NGS技術(shù)在我國出生缺陷防控體系建設(shè)中又邁出了關(guān)鍵一步。2024年1月11日,安諾優(yōu)達(dá)CNV-seq產(chǎn)品獲批,可以同時檢測羊水樣本中染色體非整倍體及CNV變異,;2024年2月21日,華大基因CNV-seq羊水檢測試劑盒獲醫(yī)療器械注冊證,繼202
  • 上新 | 這次的快速PCR,還沒出道就很紅!3kb菌P快至1s/kb!

    PCR(PolymeraseChainReaction),一個實(shí)驗(yàn)人員離不開的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。自該技術(shù)誕生以來,歷經(jīng)三十多年的發(fā)展,已在多種應(yīng)用場景中出現(xiàn)。但市面上的PCR產(chǎn)品層出不窮、五花八門,卻不一定能滿足大家的需求。是否出現(xiàn)過以下場景:我都把延伸時間增加到1min/kb以上了,退火溫度也是引物的最適溫度,還是擴(kuò)不出條帶怎么辦?今天又無法按時吃飯了!克隆平板上長滿了菌落,用PCR擴(kuò)增鑒定時間太久,跑一次就得花上大半天,擴(kuò)出來的產(chǎn)物量還少,唉。。。這次的植物樣本是我好不容易從山上采集來的,就這一
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