詳細(xì)介紹
粘蛋白檢測(cè)試劑盒
Mucin Assay Kit
——健康和美容研究試劑
◆背景
粘蛋白屬于高度糖基化蛋白質(zhì)家族,是粘膜的主要成分,例如唾液,淚液,胃液,腸液。粘蛋白的 基本構(gòu)型是枝狀糖鏈連接到多肽的大分子。糖鏈的非均質(zhì)特性使其具有多樣性,分子具有各種功能,如特異性分子識(shí)別。
一些糖鏈識(shí)別病毒和細(xì)菌的特定蛋白質(zhì)。粘蛋白錨定在腸中粘膜屏障功能中,阻止病原體和毒素通過腸壁進(jìn)入血管中。該試劑盒可用于檢測(cè)糞便中的粘蛋白含量。
粘蛋白屬于高分子(1000 kda-10000 kda)高度糖基化蛋白的家族。蛋白質(zhì)核內(nèi)的粘蛋白結(jié)構(gòu)域富含蘇氨酸、絲氨酸和羥脯氨酸,糖鏈的還原末端(GalNAc)通過翻譯后O-糖基化與這些氨基酸頻繁連接。該試劑盒具有確定糞便
粘蛋白含量組分的功能。
糞便粘蛋白測(cè)定可用作腸屏障功能的指標(biāo)。該試劑盒利用熒光檢測(cè)來測(cè)定粘蛋白的含量。
我們提供的該試劑盒可以供研究功能性食物和感染的客戶使用。
步驟1:從糞便中提取和部分純化粘蛋白。
步驟2:粘蛋白O-糖苷連接的寡糖鏈的測(cè)定通過稀堿進(jìn)行β-消除,形成糖鏈的還原端。還原碳水化合物在高溫下進(jìn)行熒光標(biāo)記以產(chǎn)生熒光縮合物。
粘蛋白的結(jié)構(gòu)
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◆試劑盒組分
組件 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 儲(chǔ)存條件 |
緩沖溶液A | 100 mL | 3 | 4-10℃ |
緩沖溶液B | 25 mL | 1 | |
緩沖溶液C | 25 mL | 1 | |
試劑A | 1.0 mL | 1 | |
試劑B | 1.5 mL | 2 | |
標(biāo)準(zhǔn)溶液 (GalNA,250 μg/mL) | 1.0 mL | 1 | |
酶溶液 | 1.5 mL | 1 |
◆優(yōu)點(diǎn)?特色
●粘蛋白和IgA能阻止細(xì)菌和毒素的入侵
●作為腸屏障的一部分,粘蛋白和IgA能防止病原菌和毒素通過腸壁轉(zhuǎn)移到血管內(nèi)。
測(cè)定理論
通過對(duì)糞便中的β-葡萄糖苷酶熱變性防止糞便粘蛋白降解
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粗提取粘蛋白
↓
用酶溶液分解淀粉
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用乙醇沉淀純化粘蛋白
↓
將試劑A加入純化的粘蛋白中,并在堿性條件下進(jìn)行熱處理。 (試劑A將與粘蛋白的糖還原末端反應(yīng),并在堿處理后發(fā)出熒光)
↓
加入緩沖液C并測(cè)定熒光強(qiáng)度(激發(fā)336nm,熒光383nm)
◆案例?應(yīng)用
喂食高脂肪食物的大鼠腸屏障部分注射多酚的效果
圖1 粘蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線 | 圖2 糞便中的粘蛋白含量 |
應(yīng)用
用于測(cè)定糞便中的粘蛋白含量。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品等級(jí) |
CSR-FFA-Mu-K01E | 粘蛋白檢測(cè)試劑盒 | 1盒 |
粘蛋白檢測(cè)試劑盒