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過癮!一文搞懂qPCR引物設(shè)計(jì),實(shí)驗(yàn)達(dá)人技能!
不知各位小伙伴在做熒光定量qPCR實(shí)驗(yàn)的時(shí)候有沒有遇到過以下這些情況?主峰左邊有雜峰,疑似引物二聚體主峰右邊有雜峰,疑似非特異擴(kuò)增基因表達(dá)無(wú)差異每當(dāng)出現(xiàn)這些情況,就意味著可能要重新做實(shí)驗(yàn)。為確保下一次實(shí)驗(yàn)不出錯(cuò),了解其原因十分重要,可能是體系污染導(dǎo)致,也可能是擴(kuò)增特異性不足導(dǎo)致。在這里小翌教大家從引物設(shè)計(jì)的角度提升擴(kuò)增特異性!在進(jìn)行qPCR引物設(shè)計(jì)時(shí),相信有不少小伙伴聽過類似“跨內(nèi)含子設(shè)計(jì)”的要求,那么,要跨內(nèi)含子設(shè)計(jì)是啥?為什么要跨內(nèi)含子設(shè)計(jì)呢?以人基因組來說,平均每個(gè)基因有8.8個(gè)外顯子和7 -
國(guó)際期刊 | Cell!十字花科植物一年生轉(zhuǎn)變?yōu)槎嗄晟P(guān)鍵基因揭秘!
你是否曾想過,為什么有些植物一年只開一次花,而有些植物卻可以年年開花?這背后,其實(shí)有著復(fù)雜的遺傳機(jī)制。在植物學(xué)中,一年生植物會(huì)在一年的周期中經(jīng)歷發(fā)芽、生長(zhǎng)、開花、結(jié)果,直至死亡。比如大豆、玉米、土豆等作物。而多年生植物在開花、結(jié)果、枝葉老去之后,在來年依舊能萌發(fā)新芽,循環(huán)往復(fù),歷經(jīng)數(shù)年,如冬小麥、白菜、胡蘿卜等。一年生與多年生植物之間并不存在著一道界線分明的分水嶺。比如,紅薯、鼠曲草在日本屬于一年生草本植物,而在熱帶地區(qū)它們卻成了多年生植物。人們對(duì)于轉(zhuǎn)變背后的進(jìn)化模式和遺傳基礎(chǔ)仍然知之甚少。在追 -
上新 | 抗Payload抗體,助力ADC藥物動(dòng)力學(xué)分析
抗體偶聯(lián)藥物(Antibody-drugconjugate,ADC),是將單克隆抗體藥物的高特異性和小分子細(xì)胞物的高活性相結(jié)合,用以提高腫瘤藥物的靶向性、減少毒副作用。ADC藥物通常由三部分組成:抗體(Antibody),有效載荷(Payload)和連接物(Linker)。圖1.抗體偶聯(lián)藥物(Antibody-drugconjugate)結(jié)構(gòu)【1】Payload特點(diǎn)有效載荷(Payload)發(fā)揮ADC的細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞毒活性,通過接頭部分與抗體共價(jià)結(jié)合的細(xì)胞毒性劑的性質(zhì)非常重要,因?yàn)槠渥饔脵C(jī)制將決定所 -
熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑, 信號(hào)半衰期高達(dá)5h,高通量藥物篩選無(wú)憂
引言熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑,作為藥物研發(fā)中的核心工具,以其實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)基因表達(dá)和信號(hào)傳遞的能力,在高通量篩選、藥效評(píng)估和靶點(diǎn)驗(yàn)證等關(guān)鍵環(huán)節(jié)中扮演著至關(guān)重要的角色。這一技術(shù)的應(yīng)用顯著提高了藥物篩選和評(píng)估的效率,加速了新藥的發(fā)現(xiàn)和開發(fā)過程。熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)原理熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)技術(shù)通過熒光素酶催化luciferin氧化成oxyluciferin并產(chǎn)生生物熒光,實(shí)現(xiàn)對(duì)螢火蟲熒光素酶活性的定量分析。該技術(shù)在miRNA靶基因驗(yàn)證、啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值。通過將目標(biāo)基因的調(diào)控元件插入熒 -
本文介紹伴刀豆球蛋白A,及其與磁珠共價(jià)偶聯(lián)后的ConA磁珠的應(yīng)用場(chǎng)景。伴刀豆球蛋白A磁珠(ConcanavalinA-CoatedMagneticBeads,簡(jiǎn)稱ConA磁珠),顧名思義,就是植物凝集素伴刀豆球蛋白A(ConA)和超順磁性納米材料進(jìn)行偶聯(lián)的一種生物磁珠。下面將逐一介紹有關(guān)ConA磁珠的那些事兒。01伴刀豆蛋白A伴刀豆球蛋白A(ConcanavalinA,ConA),是自1936年以來,第一個(gè)從刀豆(Canavaliaensiformis,洋刀豆)分離純化結(jié)晶的一種植物凝集素蛋白,
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2024年7月4日,成都生物制品研究所研制的四價(jià)HPV疫苗上市申請(qǐng)獲得NMPA受理,這也是國(guó)內(nèi)自研四價(jià)的預(yù)防因人乳頭瘤病毒所引起的宮頸癌疫苗。根據(jù)國(guó)家癌癥中心基于腫瘤登記及隨訪監(jiān)測(cè)最新數(shù)據(jù),在JNCC上發(fā)布2022年中國(guó)惡性腫瘤疾病研究情況顯示【1】,子宮頸癌位列女性癌癥發(fā)病人數(shù)的前五位,發(fā)病增長(zhǎng)率僅次于甲狀腺癌,因此防治需要同時(shí)進(jìn)行,以減少病人發(fā)病率和延長(zhǎng)存活期。圖.信息源自CDE宮頸癌類器官(organoids)是指利用宮頸腫瘤細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類
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小巧玲瓏 大顯身手!超高的性價(jià)比,讓核酸提取更輕松!
磁珠法核酸提取磁珠法作為一種新型的核酸提取技術(shù),以其高效、快速、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn),逐漸成為各種樣本核酸提取的主流方法。磁珠法利用磁性微粒的吸附作用,能夠高效地將核酸從復(fù)雜的生物樣本中分離出來,大大提高了核酸的提取效率和純度。圖1.磁珠法提取的流程自動(dòng)化提取與手動(dòng)提取優(yōu)劣勢(shì)對(duì)比以細(xì)胞RNA提取為例:自動(dòng)化提取手動(dòng)提取提取時(shí)間手動(dòng)操作:3min自動(dòng)化程序:50min提取+RT-qPCR一上午搞定,下午輕松分析數(shù)據(jù)、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)等柱式提取:1h左右Trizol提?。?h左右上午提取,下午qPCR,一天才能出 -
溫故知新 | 支原體檢測(cè)、去除、預(yù)防全流程解決方案,你知道幾個(gè)?
支原體概念和污染的影響支原體(Mycoplasma)又稱霉形體,是目前發(fā)現(xiàn)的最小、無(wú)細(xì)胞壁的原核生物,直徑大小0.1~0.3μm,能通過濾膜且呈高度多形性,是哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中相對(duì)常見且難以檢測(cè)的細(xì)菌污染物。支原體污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)造成多方面的不良影響,已經(jīng)成為在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的一個(gè)嚴(yán)重問題,保守估計(jì)常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染率為15~35%,嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。細(xì)胞培養(yǎng)中95%的支原體污染主要是由萊氏無(wú)膽甾原體、精氨酸支原體、口腔支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、豬鼻支原體引起的。支原體在培養(yǎng)基上,